家蝇幼虫抗菌肽defensin对食管癌细胞增殖、侵袭迁移的抑制作用研究

发布时间：2017-06-29 13:15

  本文关键词：家蝇幼虫抗菌肽defensin对食管癌细胞增殖、侵袭迁移的抑制作用研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:明确家蝇防御素成熟蛋白MD对食管癌细胞的抑制作用以及其可能的作用机制。方法:1.将成功构建的p GEX-6P-1/MD表达载体转化入大肠杆菌感受态细胞BL21,IPTG诱导MD蛋白表达,纯化目的蛋白。2.将不同浓度的MD蛋白作用于食管癌细胞以及正常食管上皮细胞,检测细胞增殖、侵袭迁移能力。3.利用原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)检测MD蛋白作用前后食管癌细胞与正常食管上皮细胞的生物力学改变。结果:1.MD蛋白能抑制食管癌细胞KYSE150增殖,但对正常食管上皮细胞SHEE无影响;2.家蝇防御素成熟蛋白MD能够抑制食管癌细胞KYSE150侵袭能力,但对正常食管上皮细胞SHEE无明显影响;3.家蝇防御素成熟蛋白MD能够抑制食管癌细胞KYSE150迁移能力,但对正常食管上皮细胞SHEE无明显影响影响;4.原子力显微镜观察家蝇防御素成熟蛋白MD作用前后的细胞形态发现,MD蛋白作用后食管癌细胞KYSE150表面变粗糙,而正常食管上皮细胞SHEE无明显变化;5.作用后食管癌细胞KYSE150粘性升高,而正常食管上皮SHEE无明显变化;6.作用后食管癌细胞KYSE150弹力降低,而正常食管上皮细胞SHEE无明显变化。结论:MD蛋白通过增高食管癌细胞细胞膜表面粘性、降低细胞膜表面弹力来抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭迁移,发挥肿瘤抑制作用,且不影响正常细胞,可以作为肿瘤靶向治疗的替代药物。
【关键词】：抗菌肽 防御素 食管癌细胞 增殖 侵袭迁移 原子力显微镜
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.1
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 常用缩略词中英文对照表10-11
• 前言11-12
• 1 实验材料与方法12-27
• 1.1 实验材料12-18
• 1.2 实验方法18-24
• 1.3 细胞功能学相关实验24-26
• 1.4 原子力显微镜检测26
• 1.5 数据统计分析26-27
• 2 结果27-33
• 2.1 MD蛋白的诱导表达与纯化鉴定27
• 2.2 MD蛋白能抑制食管癌细胞的增殖能力，并呈现出剂量依赖性，但对正常食管上皮细胞无影响27-28
• 2.3 家蝇防御素成熟蛋白MD能抑制食管癌细胞的迁移能力，且对正常食管上皮细胞无影响28-29
• 2.4 MD蛋白抑制食管癌细胞侵袭能力，对正常食管上皮细胞无影响29-30
• 2.5 MD蛋白作用后KYSE150 细胞膜表面粗糙度增加，而SHEE细胞膜表面粗糙度变化不明显30-31
• 2.6 MD蛋白作用后KYSE150 细胞膜粘性增大，而SHEE细胞膜粘性无明显变化31
• 2.7 家蝇防御素成熟蛋白MD作用后KYSE150 弹力下降，而SHEE无明显变化31-33
• 3 讨论33-36
• 4 结论36-37
• 参考文献37-39
• 综述39-50
• 参考文献45-50
• 致谢50-51
• 研究成果51-52
• 个人简历52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 刘丽君,彭建新,洪华珠,叶雯,乔媛媛;线粒体在细胞凋亡中的变化与作用[J];细胞生物学杂志;2005年02期

2 查向东,徐康森,刘兢;阳离子抗菌肽研究进展[J];中国药理学通报;2003年07期

3 赫捷;邵康;;中国食管癌流行病学现状、诊疗现状及未来对策[J];中国癌症杂志;2011年07期

4 金小宝;朱家勇;马艳;刘雷山;;家蝇抗菌肽基因Cecropin在COS-7细胞中的表达及产物活性初步研究[J];中国人兽共患病学报;2007年06期

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本文编号：498033