康莱特注射液联合放疗对Lewis肺癌小鼠MDSC、HIF-1α表达的影响

发布时间：2017-07-20 04:17

  本文关键词：康莱特注射液联合放疗对Lewis肺癌小鼠MDSC、HIF-1α表达的影响

  更多相关文章： 康莱特注射液 Lewis肺癌 肿瘤微环境 缺氧诱导因子-1α 髓系抑制细胞 放疗

【摘要】：目的:手术、放射治疗、化学治疗等传统恶性肿瘤治疗方法难以解决恶性肿瘤的复发转移问题。肿瘤微环境的改变是肿瘤复发转移的关键。中医药能够个体化、多层次、多靶点控制肿瘤生长、对抗转移、减少复发,与放化疗结合,能够增效减毒。临床实践中发现放疗联合康莱特注射液(Kanglaite,KLT)具有增效减毒作用。关于KLT对肿瘤微环境的影响研究报道不多。本研究通过检测KLT对Lewis肺癌小鼠放疗敏感性的影响,进一步探讨KLT对髓系抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSC)的数目及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响,进一步分析KLT的作用机制。方法:1体外培养Lewis肺癌细胞,取传至3-4代生长好的细胞接种于小鼠左腋皮下,建立Lewis肺癌移植瘤模型。观察记录小鼠的一般情况,如体重、进食、活动、毛发等情况。待肿瘤最长径为0.8-1cm时,挑选肿瘤大小较均一的荷瘤小鼠24只,随机分为对照组(control)、康莱特组(KLT)、放疗组(RT)及康莱特联合放疗组(KLT+RT)4组,每组6只,生理盐水(NS)处理组作为对照组,分别用KLT、NS+RT、KLT+RT处理;选取6只大小较均一的健康小鼠作为健康对照组(NC)。2各组小鼠干预处理结束后,脱颈方法处死小鼠,称取小鼠的体重,完整剥离小鼠瘤组织及脾脏、肺脏,并测量瘤体大小。3采用实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)技术检测各组小鼠瘤体和肺组织中HIF-1α基因表达。4采用流式细胞技术(flow cytometry,FCM)检测各组小鼠脾脏、瘤体中MDSC的数目及比例。5采用SPSS 17.0软件包建立数据库,将相关资料结果录入数据库,进行统计分析。计数资料以率(%)表示,计量资料用x±s表示。多组样本间均数比较应用单因素方差分析,组间多重比较应用LSD检验,各检验均以P0.05为差异有统计学意义。结果:1各组小鼠一般情况:小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞后约1周建模成功,约14天肿瘤生长最长径为1.5-2.0cm。荷瘤小鼠进食、活动、毛发等一般情况逐渐变差,对照组小鼠最明显。2各组对荷瘤小鼠的抑瘤效应:对照组、KLT组、RT组、KLT+RT组平均肿瘤体积分别为(6.78±0.90)cm3、(6.52±0.92)cm3、(0.87±0.53)cm3、(0.08±0.30)cm3,三个治疗组的肿瘤体积均低于对照组,与对照组相比,KLT组小鼠肿瘤体积缩小,但无统计学意义(P0.05),RT组、KLT+RT组小鼠肿瘤体积缩小,均有统计学意义(P0.05);与KLT组相比,RT组、KLT+RT组肿瘤体积缩小更明显,有统计学意义(P0.05);与RT组相比,KLT+RT组肿瘤体积缩小更明显,有统计学意义(P0.05)(Table 2)3各组小鼠肿瘤组织、肺组织中HIF-1α的基因表达的比较:健康对照小鼠肺组织中不表达HIF-1α基因,Lewis肺癌小鼠瘤组织、肺组织中均表达HIF-1α基因,而肿瘤组织中HIF-1α基因的表达明显高于肺组织,差异有统计学意义(P0.05);实时荧光定量分析显示,与NS组相比,KLT组小鼠瘤组织中HIF-1α基因表达降低,差异有统计学意义(P0.05);RT组HIF-1α基因表达水平增高,差异有统计学意义(P0.05);KLT+RT组表达亦较低,有统计学意义(P0.05);与KLT+RT组相比,KLT组HIF-1α基因表达更低,差异有统计学意义(P0.05)(Fig.3-8,Table 3)。4各组小鼠肿瘤组织、脾脏组织中MDSC百分比的比较:健康对照小鼠脾脏中几乎无MDSC表达,而Lewis肺癌小鼠脾脏、瘤组织中均存在MDSC表达,且瘤组织中MDSC表达较脾脏中高;流式分析结果显示,与NS组相比,KLT组小鼠脾脏、瘤组织中MDSC百分比显著较低,差异有统计学意义(P0.05),RT组脾脏及瘤组织中MDSC百分比略升高,但差异无统计学意义(P0.05);KLT+RT组脾脏、瘤组织中MDSC百分比降低,有统计学意义(P0.05);与KLT+RT组相比,KLT组脾脏、瘤组织中MDSC百分比降低更显著,差异有统计学意义(P0.05)(Fig.9-17,Table 4)。结论:1 KLT可抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长、增强小鼠免疫功能、改善缺氧状态,其机制可能与抑制MDSC、HIF-1αm RNA表达有关。2康莱特联合放疗具有增效减毒的作用,其机制可能是康莱特能够改善由放疗引起的肿瘤缺氧及免疫抑制微环境。
【关键词】：康莱特注射液 Lewis肺癌 肿瘤微环境 缺氧诱导因子-1α 髓系抑制细胞 放疗
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文缩写10-12
• 前言12
• 材料与方法12-18
• 结果18-21
• 附图21-30
• 附表30-32
• 讨论32-36
• 结论36
• 参考文献36-41
• 综述 中医药对非小细胞肺癌肿瘤微环境调控的研究概述41-50
• 参考文献47-50
• 致谢50-51
• 个人简历51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张汀荣;陆向东;张瑶;赵韬;赵臻;潘宇凯;;康莱特注射液对晚期肺癌患者免疫功能影响的研究[J];中国社区医师(医学专业);2013年10期

2 李莉;张洪珍;戴福生;邱刚;房保栓;;康莱特联合放疗治疗老年局部晚期非小细胞肺癌疗效观察[J];中国肿瘤临床;2012年24期

3 李莉;戴福生;马艳凯;贺丽亚;;康莱特注射液对老年晚期非小细胞肺癌患者生活质量的影响[J];河北中医;2012年11期

4 张真发;王长利;;康莱特在肺癌外科治疗中的应用[J];中国肿瘤临床;2012年16期

5 张东兴;卢宜民;;康莱特注射液对晚期肺癌患者免疫功能和生活质量的影响[J];现代肿瘤医学;2012年08期

6 许健;沈雯;孙金权;吴晓莉;牟一平;李毅;;薏苡仁油对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长及VEGF和bFGF表达的影响[J];中草药;2012年04期

7 薛娜;林洪生;;晚期非小细胞肺癌的中医维持治疗[J];临床肿瘤学杂志;2012年01期

8 谢伟;朱晓春;朱波;;MDSCs为靶点的肿瘤治疗策略研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年06期

9 李海军;方全华;王辉;张国庆;;康莱特抑制肝癌细胞侵袭能力及其对相关基因MMP-9表达的影响[J];实用肿瘤杂志;2010年06期

10 李刚;徐钧;;康莱特注射液抑制肿瘤生长和瘤体周围微淋巴管生成的实验研究[J];中国医疗前沿;2010年07期

，

本文编号：566235