和厚朴酚联合阿糖胞苷在急性髓系白血病中的作用及机制

发布时间：2017-08-09 19:40

  本文关键词：和厚朴酚联合阿糖胞苷在急性髓系白血病中的作用及机制

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【摘要】：目的：研究和厚朴酚联合阿糖胞苷在急性髓系白血病细胞株THP-1细胞增殖和凋亡的协同作用,探索其潜在的抗急性髓系白血病机制,为治疗急性髓系白血病提供新的方法。 方法：细胞形态学观察和厚朴酚或阿糖胞苷单独或联合作用对THP-1细胞形态的影响；CCK8法和流式细胞术(细胞凋亡和周期)检测二者单独或联合作用于THP-1细胞对细胞增殖和凋亡的影响；Apolive-GloTM双重检测分析单药或联合用药处理对细胞活力和caspase3/7表达的影响；MicroRNA基因芯片分析二者单独或联合作用对THP-1细胞MicroRNA的表达的影响,以及靶基因的预测、筛选与鉴定；采用单因素方差分析(one way ANOVA),以P0.05作为有差别统计学意义。 结果：(1)细胞形态学观察结果显示,和厚朴酚或阿糖胞苷单独或联合作用36小时,都可以对THP-1细胞形态产生影响,其中联合用药组细胞形态变化更为明显；(2)CCK-8结果显示：和厚朴酚6μmol/l和8μmol/l单独作用时,对THP-1细胞增殖有抑制作用；单用1μmol/l阿糖胞苷时抑制作用不明显；二者联合后,与单用和厚朴酚及正常组分别比较,2μmol/l,4μmol/l及6μmol/l和厚朴酚联合1μmol/l阿糖胞苷时,差别具有统计学意义(P0.05)；(3)流式细胞术分析结果显示：和厚朴酚在2μmol/l,4μmol/l及8μmol/l浓度下单独作用36小时,THP-1细胞的总凋亡率(早期凋亡率+晚期凋亡率)分别为8.37±0.61%,11.78±0.82%,46.67±0.69%,阿糖胞苷单药处理组和正常对照组分别为12.81±0.35%和6.64±0.87%,仅高浓度和厚朴酚(8μmol/l)作用时可诱导细胞发生明显凋亡；然而和厚朴酚联合1μmol/l阿糖胞苷处理36小时后,THP-1细胞总凋亡率依次为24.8±0.73%,26.49±1.85%及48.774±1.55%,与单药组和正常对照组相比,其诱导细胞凋亡效应更加明显；(4)细胞周期方面：和厚朴酚单独作用于THP-1细胞12小时后,可以使细胞阻滞在GO/G1期,下调S期细胞比例,且与浓度成正相关,联合阿糖胞苷组较单药组有显著统计学差异(P0.05)；(5)双重检测结果显示,和厚朴酚可抑制THP-1细胞活力,激活caspase3/7表达,诱导细胞凋亡,而联合阿糖胞苷后这种效应显著增强；提示二者联合在抑制细胞活力和促进细胞凋亡方面有协同作用；(6)MicroRNA结果显示和厚朴酚单药或阿糖胞苷单药或二者联合用药可引起THP-1细胞中约100种以上的miRNA发生明显上调或下调,进而发挥抗急性髓系白血病效应,主要涉及了MAPK信号通路和癌症信号通路等信号途径。 结论：和厚朴酚或阿糖胞苷单独作用在抑制THP-1细胞增殖,诱导细胞凋亡方面有一定的作用,二者联合用药后时具有显著的协同作用,提示和厚朴酚联合阿糖胞苷在治疗急性髓系白血病方面有重要意义。
【关键词】：和厚朴酚 阿糖胞苷 急性髓系白血病 caspase3/7 microRNA分析
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R733.71
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 缩略语10-11
• 目录11-12
• 1、研究背景12-14
• 2、材料与方法14-18
• 3、结果18-33
• 4、讨论33-36
• 5、小结36-37
• 参考文献37-41
• 综述41-50
• 参考文献45-50
• 作者简历50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

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本文编号：647003