力竭运动及钝挫伤各时相大鼠骨骼肌MuRF1、MAFbx及Pax7的变化及其机制研究
发布时间：2022-12-03 19:06
实验目的:本文拟通过一次性力竭运动和钝挫伤模型诱导Wistar大鼠骨骼肌损伤,通过检测NF-κB、MuRF1、MAFbx、Pax7在力竭运动和钝挫伤后即刻、24和48小时不同时相的变化,探讨NF-κB、MuRF1、MAFbx、Pax7在骨骼肌损伤修复再生中的变化及其机制。研究方法:实验选用Wistar纯系清洁级6-8周龄雄性大鼠42只,随机分为7组,每组各6只:安静对照组（C）、力竭运动即刻组（E0）、力竭运动后24H组（E24）、力竭运动后48H组（E48）、钝挫伤即刻组（DO）、钝挫伤后24H组（D24）、钝挫伤后48H组（D48）。安静对照组取材:将大鼠腹腔注射麻醉,取下左侧腓肠肌,分为三份,一份待测酶联免疫ELISA,一份待测Western blot,另一份待测实时荧光定量PCR。运动组和钝挫伤组取材:Wistar大鼠分别在力竭运动和钝挫伤后即刻、24和48小时取材,取材步骤同上。研究结果:（1）MuRF1的实验结果:与C组相比,E0组、E24组大鼠骨骼肌MuRF1蛋白表达显著升高（p＜0.05）,E0组大鼠骨骼肌MuRF1mRNA表达水平显著升高（p＜0.05）,E48组大鼠...
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
前言
第一部分 文献综述
1 骨骼肌的损伤与修复
1.1 骨骼肌概述
1.2 骨骼肌的组织机构及功能
1.3 骨骼肌损伤
1.3.1 骨骼肌损伤分类
1.3.2 骨骼肌损伤机制
1.4 骨骼肌损伤动物模型
1.4.1 骨骼肌损伤动物模型的建立
1.5 骨骼肌损伤的再修复
1.5.1 骨骼肌损伤的炎性反应
1.5.2 骨骼肌损伤再修复的内源周期
1.5.3 骨骼肌损伤再修复的分类
2 MuRF1、MAFbx在骨骼肌中的表达机制
2.1 骨骼肌萎缩分子的生物学机制
2.2 骨骼肌泛素蛋白酶解系统(Ups)
2.2.1 泛素蛋白酶解系统(Ups)与泛素连接酶E3
2.2.2 MuRF1与MAFbx的生物特性
2.3 NF-κB/MuRF1信号通路与骨骼肌损伤
2.3.1 NF-κB/MuRF1信号通路
2.3.2 NF-κB/MuRF1信号通路与骨骼肌损伤
3 肌卫星细胞与骨骼肌损伤修复
3.1 肌卫星细胞的发现与自我更新
3.2 卫星细胞在肌肉损伤修复中的作用
3.3 骨骼肌卫星细胞的特异性标记与鉴定--Pax7
3.4 骨骼肌卫星细胞Pax7与骨骼肌损伤修复
第二部分 实验部分
1 材料与方法
1.1 实验主要仪器设备
1.2 主要实验试剂
1.3 动物模型的建立
1.3.1 实验动物和喂养
1.3.2 实验动物分组
1.3.3 骨骼肌损伤方案
1.4 样本取材与处理
1.4.1 样本取材
1.4.2 组织样本制备
1.5 指标测定与方法
1.5.1 骨骼肌组织总RNA的提取
1.5.2 RNA反转录
1.5.3 实时荧光定量(Real-Time PCR)
1.5.4 蛋白质免疫印迹(Western Bloting,WB)
1.5.5 酶联免疫法
1.6 统计学处理
2 实验结果
2.1 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌MuRF1mRNA的表达变化
2.2 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌MAFbxmRNA的表达变化
2.3 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌Pax7mRNA的表达变化
2.4 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌MuRF1蛋白含量的比较
2.5 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌NF-κB含量的比较
2.6 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌Pax7含量的比较
3 讨论与分析
3.1 力竭运动和钝挫伤对各时相大鼠骨骼肌NF-κB/ MuRF1通路的影响
3.2 力竭运动和钝挫伤对各时相大鼠骨骼肌MuRF1和MAFbx的影响
3.3 力竭运动和钝挫伤对各时相大鼠骨骼肌Pax7的影响
4 结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同抗萎缩运动模式对泛素蛋白酶体亚基及基因表达的影响[J]. 徐帅,李世昌,方幸. 南京体育学院学报(自然科学版). 2016(05)
[2]骨骼肌卫星细胞的增殖分化及其影响因素[J]. 邢华医,周谋望. 中国康复医学杂志. 2016(01)
[3]骨骼肌卫星细胞的研究进展[J]. 张萍,马月辉,焦淑清,关伟军. 黑龙江畜牧兽医. 2015(13)
[4]运动对肌卫星细胞的影响及其机制研究进展[J]. 邱烈峰. 信阳师范学院学报(自然科学版). 2015(03)
[5]肌肉萎缩盒F蛋白和肌肉特异性环指蛋白1对慢性肾脏病患者骨骼肌萎缩的调控机制[J]. 张月月,袁伟杰. 肾脏病与透析肾移植杂志. 2015(03)
[6]TWEAK/Fn14信号通路在骨骼肌代谢相关基因表达及能量代谢中作用研究进展[J]. 李慧阁,傅力. 中国运动医学杂志. 2015(06)
[7]运动和制动大鼠腓肠肌内p-Akt/MuRF1/FoxO1的蛋白表达变化[J]. 苏艳红,宿哲,张凯,袁乾坤,刘强,吕申,王昭辉,邹伟. 生理学报. 2014(05)
[8]骨骼肌卫星细胞自我更新的分子调节[J]. 熊慧,浦亚斌,马月辉,扈清云,关伟军,李向臣. 生物医学工程学杂志. 2014(05)
[9]不同运动方式对小鼠骨骼肌肌萎缩相关因子表达的影响[J]. 陈彩珍,卢健,季浏. 沈阳体育学院学报. 2014(05)
[10]力竭运动及钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞及相关调节因子的影响[J]. 潘同斌,左伟,夏素文,张乐,朱超,焦寒凝. 中国运动医学杂志. 2014(07)
博士论文
[1]转录因子NF-kB信号通路在胰腺炎发生中的机制研究[D]. 黄浩杰.第二军医大学 2012
[2]骨骼肌损伤与修复过程中炎症反应与肌卫星细胞再生关系的研究[D]. 孙茹.东北师范大学 2009
硕士论文
[1]冬眠不同时期达乌尔黄鼠骨骼肌中NF-κB信号通路的变化及其作用的研究[D]. 龚令琛.西北大学 2016
[2]不同模式的低氧训练引起的骨骼肌蛋白质降解与NF-κB/MuRF1的关系研究[D]. 胡要娟.扬州大学 2016
[3]力竭运动与钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞体外增殖及Hes1/Jagged1/Pax7含量的影响[D]. 李娜.扬州大学 2016
[4]不同训练模式对大鼠腓肠肌p-Akt和MuRF1表达的影响[D]. 宿哲.辽宁师范大学 2013
[5]失肌皮神经损伤胸大肌部分移位重建屈肘术后供受肌内MuRF1和MAFbx的表达变化[D]. 岳宁.遵义医学院 2013
本文编号：3706802
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
前言
第一部分 文献综述
1 骨骼肌的损伤与修复
1.1 骨骼肌概述
1.2 骨骼肌的组织机构及功能
1.3 骨骼肌损伤
1.3.1 骨骼肌损伤分类
1.3.2 骨骼肌损伤机制
1.4 骨骼肌损伤动物模型
1.4.1 骨骼肌损伤动物模型的建立
1.5 骨骼肌损伤的再修复
1.5.1 骨骼肌损伤的炎性反应
1.5.2 骨骼肌损伤再修复的内源周期
1.5.3 骨骼肌损伤再修复的分类
2 MuRF1、MAFbx在骨骼肌中的表达机制
2.1 骨骼肌萎缩分子的生物学机制
2.2 骨骼肌泛素蛋白酶解系统(Ups)
2.2.1 泛素蛋白酶解系统(Ups)与泛素连接酶E3
2.2.2 MuRF1与MAFbx的生物特性
2.3 NF-κB/MuRF1信号通路与骨骼肌损伤
2.3.1 NF-κB/MuRF1信号通路
2.3.2 NF-κB/MuRF1信号通路与骨骼肌损伤
3 肌卫星细胞与骨骼肌损伤修复
3.1 肌卫星细胞的发现与自我更新
3.2 卫星细胞在肌肉损伤修复中的作用
3.3 骨骼肌卫星细胞的特异性标记与鉴定--Pax7
3.4 骨骼肌卫星细胞Pax7与骨骼肌损伤修复
第二部分 实验部分
1 材料与方法
1.1 实验主要仪器设备
1.2 主要实验试剂
1.3 动物模型的建立
1.3.1 实验动物和喂养
1.3.2 实验动物分组
1.3.3 骨骼肌损伤方案
1.4 样本取材与处理
1.4.1 样本取材
1.4.2 组织样本制备
1.5 指标测定与方法
1.5.1 骨骼肌组织总RNA的提取
1.5.2 RNA反转录
1.5.3 实时荧光定量(Real-Time PCR)
1.5.4 蛋白质免疫印迹(Western Bloting,WB)
1.5.5 酶联免疫法
1.6 统计学处理
2 实验结果
2.1 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌MuRF1mRNA的表达变化
2.2 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌MAFbxmRNA的表达变化
2.3 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌Pax7mRNA的表达变化
2.4 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌MuRF1蛋白含量的比较
2.5 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌NF-κB含量的比较
2.6 力竭运动和钝挫伤各时相大鼠骨骼肌Pax7含量的比较
3 讨论与分析
3.1 力竭运动和钝挫伤对各时相大鼠骨骼肌NF-κB/ MuRF1通路的影响
3.2 力竭运动和钝挫伤对各时相大鼠骨骼肌MuRF1和MAFbx的影响
3.3 力竭运动和钝挫伤对各时相大鼠骨骼肌Pax7的影响
4 结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同抗萎缩运动模式对泛素蛋白酶体亚基及基因表达的影响[J]. 徐帅,李世昌,方幸. 南京体育学院学报(自然科学版). 2016(05)
[2]骨骼肌卫星细胞的增殖分化及其影响因素[J]. 邢华医,周谋望. 中国康复医学杂志. 2016(01)
[3]骨骼肌卫星细胞的研究进展[J]. 张萍,马月辉,焦淑清,关伟军. 黑龙江畜牧兽医. 2015(13)
[4]运动对肌卫星细胞的影响及其机制研究进展[J]. 邱烈峰. 信阳师范学院学报(自然科学版). 2015(03)
[5]肌肉萎缩盒F蛋白和肌肉特异性环指蛋白1对慢性肾脏病患者骨骼肌萎缩的调控机制[J]. 张月月,袁伟杰. 肾脏病与透析肾移植杂志. 2015(03)
[6]TWEAK/Fn14信号通路在骨骼肌代谢相关基因表达及能量代谢中作用研究进展[J]. 李慧阁,傅力. 中国运动医学杂志. 2015(06)
[7]运动和制动大鼠腓肠肌内p-Akt/MuRF1/FoxO1的蛋白表达变化[J]. 苏艳红,宿哲,张凯,袁乾坤,刘强,吕申,王昭辉,邹伟. 生理学报. 2014(05)
[8]骨骼肌卫星细胞自我更新的分子调节[J]. 熊慧,浦亚斌,马月辉,扈清云,关伟军,李向臣. 生物医学工程学杂志. 2014(05)
[9]不同运动方式对小鼠骨骼肌肌萎缩相关因子表达的影响[J]. 陈彩珍,卢健,季浏. 沈阳体育学院学报. 2014(05)
[10]力竭运动及钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞及相关调节因子的影响[J]. 潘同斌,左伟,夏素文,张乐,朱超,焦寒凝. 中国运动医学杂志. 2014(07)
博士论文
[1]转录因子NF-kB信号通路在胰腺炎发生中的机制研究[D]. 黄浩杰.第二军医大学 2012
[2]骨骼肌损伤与修复过程中炎症反应与肌卫星细胞再生关系的研究[D]. 孙茹.东北师范大学 2009
硕士论文
[1]冬眠不同时期达乌尔黄鼠骨骼肌中NF-κB信号通路的变化及其作用的研究[D]. 龚令琛.西北大学 2016
[2]不同模式的低氧训练引起的骨骼肌蛋白质降解与NF-κB/MuRF1的关系研究[D]. 胡要娟.扬州大学 2016
[3]力竭运动与钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞体外增殖及Hes1/Jagged1/Pax7含量的影响[D]. 李娜.扬州大学 2016
[4]不同训练模式对大鼠腓肠肌p-Akt和MuRF1表达的影响[D]. 宿哲.辽宁师范大学 2013
[5]失肌皮神经损伤胸大肌部分移位重建屈肘术后供受肌内MuRF1和MAFbx的表达变化[D]. 岳宁.遵义医学院 2013
本文编号：3706802
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