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基于检测一氧化氮和心肌黄酶荧光探针的设计、合成及性质研究

发布时间:2024-03-26 19:44
  荧光探针可用于生物科学研究、开发新药物、诊断临床疾病等,由于其具有灵敏度高、成本低等优点,目前已经在生活中的各个领域得到了应用。一氧化氮(NO)是一种重要的气体信使分子,它参与了大量的生理调节活动,在生物体内发挥着关键的作用。研究表明,一氧化氮与许多的人体疾病如心血管疾病、糖尿病等都有着密切的关系。因此,一氧化氮的研究在医学领域有着重要的意义。本文设计合成了一个基于罗丹明衍生物,能够专一识别一氧化氮的荧光探针分子Rh-NO。该化合物在溶剂CH3CH2OH:PBS=1:99,pH=7.4的条件下,与一氧化氮进行结合,在595 nm出释放出强烈的红色荧光。化合物Rh-NO的水溶性良好,同时也成功的应用在了细胞与线虫的荧光成像实验中。本文设计合成了一种用于识别心肌黄酶的荧光探针分子DCM-Q。心肌黄酶是一种广泛分布在几乎所有动物的身体组织中的一种细胞质黄素蛋白酶,它能阻止或减少自由基产生,保护细胞免受损伤,通常被认为是一种保护酶。此外,心肌黄酶在多种癌症组织中的含量远高于正常组织,因此,开发心肌黄酶探针可用于癌症的检测或治疗。我们对合成的探针分子D...

【文章页数】:79 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 绪论
    1.2 荧光探针简介
    1.3 气体信使分子荧光探针研究进展
        1.3.1 一氧化氮荧光探针研究进展
        1.3.2 一氧化碳荧光探针研究进展
        1.3.3 硫化氢荧光探针研究进展
    1.4 低氧荧光探针研究进展
第二章 检测NO气体的荧光探针及其在活体成像中的应用
    2.1 概论
    2.2 探针分子的设计
        2.2.1 罗丹明衍生物类荧光探针的研究进展
        2.2.2 探针分子的设计原理
    2.3 探针分子Rh-NO的合成路线
    2.4 实验部分
        2.4.1 仪器
        2.4.2 药品
        2.4.3 合成部分
    2.5 探针Rh-NO的光谱测试
        2.5.1 磷酸盐缓冲溶液(PBS)的配制
        2.5.2 NO-PBS溶液的配制
        2.5.3 化合物Rh-NO的荧光光谱测试
        2.5.4 化合物Rh-NO的紫外光谱测试
        2.5.5 各种干扰离子与化合物Rh-NO作用后荧光光谱的测定
        2.5.6 各种干扰离子与化合物Rh-NO作用后紫外光谱的测定
        2.5.7 化合物Rh-NO的竞争性试验测定
        2.5.8 化合物Rh-NO的检测极限测定
    2.6 化合物Rh-NO的生物成像实验
        2.6.1 化合物Rh-NO在Hi-5细胞中的荧光成像实验
        2.6.2 化合物Rh-NO在线虫中的荧光成像实验
    2.7 结果与讨论
        2.7.1 化合物Rh-NO的光谱测试结果
        2.7.2 化合物Rh-NO的生物测试结果
    2.8 本章小结
第三章 检测心肌黄酶的荧光探针及其在活体成像中的应用
    3.1 概论
    3.2 探针分子的设计
        3.2.1 心肌黄酶类荧光探针的研究进展
        3.2.2 探针分子的设计原理
    3.3 探针分子的合成路线及作用机理
        3.3.1 探针DCM-Q的合成路线
        3.3.2 DCM-Q与心肌黄酶作用的机理
    3.4 实验部分
        3.4.1 仪器
        3.4.2 药品
        3.4.3 合成部分
    3.5 探针DCM-Q的光谱测试
        3.5.1 NADH溶液的配制
        3.5.2 心肌黄酶(DTD)溶液的配制
        3.5.3 化合物DCM-Q的时间与温度响应测试
        3.5.4 化合物DCM-Q与NADH,DCM-Q与DTD反应以及DCM-Q与NADH和DTD反应的荧光光谱测试
        3.5.5 化合物DCM-Q的荧光光谱测试
        3.5.6 各种干扰离子与化合物DCM-Q作用后荧光光谱的测定
        3.5.7 化合物DCM-Q的竞争性试验测定
        3.5.8 化合物DCM-Q的检测极限测定
    3.6 化合物DCM-Q的生物测试实验
        3.6.1 MTS法检测细胞活性实验
        3.6.2 化合物DCM-Q在Hela细胞中的荧光成像实验
    3.7 结果与讨论
        3.7.1 化合物DCM-Q的光谱测试结果
        3.7.2 化合物DCM-Q的生物测试结果
    3.8 本章小结
第四章 总结与展望
附录一 Rh-NO的相关图谱
附录二 DCM-Q的相关图谱
参考文献
攻读硕士研究生期间发表学术论文情况
致谢



本文编号:3939592

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