通过CRISPR/Cas系统构建miR-17-92基因簇双切载体

发布时间：2024-04-22 04:54

　　通过CRISPR/Cas系统来构建miR-17-92基因簇的双切载体,研究结果表明:在miR-17-92基因簇的序列上找到了2个PAM(TGG和GGG)位点,从而得到了2个原间隔序列,设计合成基因簇双链crRNA;合成该片段并将其插入到p X260载体,使得在同一个载体上虽然只有一个g-RNA,但能够同时切割两个不同的靶位点;将该载体转染NIH3T3细胞验证切割效率,PCR结果和测序结果显示,所构建的CRISPR系统可以对基因片段进行有效切割。

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1材料与方法
    1.1 crRNA序列的设计
    1.2质粒载体的构建
    1.3 miR-17-92基因簇双切载体切割效率检测
2结果与分析
    2.1 crRNA序列的设计
    2.2 CRISPR/Cas系统miR-17-92基因簇双切载体的构建
    2.3 miR-17-92基因簇双切载体的检测
        2.3.1 PCR检测
        2.3.2灰度分析切割效率
        2.3.3测序分析
3结论与讨论



本文编号：3961957