StBAG3基因介导的马铃薯对晚疫病抗性研究

发布时间：2024-04-23 01:51

　　为了探究来源于马铃薯中的StBAG3基因在马铃薯抗性建立过程中可能具有的功能,以夏坡蒂马铃薯的离体叶片为试验材料,利用马铃薯的瞬时表达体系对StBAG3基因的功能进行了初步的研究。结果表明,在瞬时表达StBAG3基因的马铃薯离体叶片上人工接种马铃薯晚疫病菌,24,48,72,96 h后接种位置病斑的相对面积较对照病斑显著减少了1.92～39.15百分点,说明瞬时表达StBAG3基因后显著提高了马铃薯对晚疫病菌的抗性水平。这一结果也从对接种部位坏死细胞的染色中得到了证实。H₂O₂定性和定量测定的结果表明,瞬时表达StBAG3基因后接种部位H₂0₂积累量在接种后0～48 h差异不显著,接种后72,96 h与对照差异显著,二者均在72 h达到最大值,分别为0.146,0.086μmol/g。ROS清除酶活性测定的结果表明,接种后瞬时表达StBAG3基因部位SOD和CAT的活性随着接种时间推移,变化的模式有所差异,但二者在0～96 h均高于对照叶片,而POD的活性在接种后0～72 h与对照叶片没有显著差异,...

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【部分图文】：

图1马铃薯离体叶片瞬时表达StBAG3后接种晚疫菌的示意图

将在黑麦培养基上培养20d的致病疫霉菌转入装有无菌水的离心管中,4℃下放置3h诱导游动孢子的释放,将孢子浓度调至1×106个/mL。在叶片的右侧接种10μL的孢子液,叶片的左侧接种水作为对照。将接种叶片放置在光照培养箱中(光照16h,黑暗8h,温度为18～22℃,....

图2瞬时表达StBAG3后接种晚疫菌病斑的变化

为了探究StBAG3基因在马铃薯抵抗晚疫病菌侵染过程中的作用,以瞬时表达空载体后接种晚疫菌的叶片部位作为对照,测定了在瞬时表达StBAG3基因的马铃薯离体叶片上接种晚疫病菌后不同时间点病斑的大小,结果表明(图2),接种48h后,当对照的叶片部位开始出现水渍状的病斑,而瞬时表达S....

图3瞬时表达StBAG3叶片接种晚疫菌后死亡细胞数量的检测(台盼蓝染色)

由于台盼蓝染色可以用来定性研究坏死细胞的数量,因此,可以利用接种部位染色面积的大小和颜色定性比较病斑的大小。由图3可知,在接种24h后,瞬时表达StBAG3基因部位的死亡细胞数量与瞬时表达空载体的对照没有明显的差异,然而在接种48h后,对照部位蓝色的面积以及深度都要大于瞬时表....

图4瞬时表达StBAG3基因后定量和定性检测接种部位H2O2的积累量

过氧化氢的大量积累往往被认为是标定植物抗病水平的一个重要指标,因此,过氧化氢浓度的定量测定能够客观的反映接种部位的抗性水平。为了明确瞬时表达StBAG3基因后导致的病斑变化原因是否为过氧化氢积累水平,对瞬时表达目的基因和空载体后马铃薯离体叶片进行晚疫病菌接种,对接种后不同时间点的....

本文编号：3962443