消癌平对肝癌细胞侵袭转移的体内外实验研究

发布时间：2020-11-05 05:27

　　目的：原发性肝癌(primary liver cancer，PLC)是我国常见恶性肿瘤之一，死亡率居我国恶性肿瘤的第二位。当前治疗原发性肝癌的首选方法是手术切除，然而有资料表明，肝癌术后3年复发、转移率高达57%-81%，严重威胁着人们的生命健康。因此，寻求有效抑制侵袭转移与复发已成为当今肝癌研究的重点和难点。中药消癌平为临床常用的抗癌药物，有高效低毒的特点，能有效抑制多种肿瘤的生长，延长患者的生存期并有效改善生存质量。本实验通过观察消癌平在体内外实验中对肝癌细胞侵袭转移的影响，探讨其可能的抗侵袭转移机制，为临床应用提供实验依据。方法： 1.细胞水平：细胞采用传代培养。分别将低、中、高剂量(10mg/mL、30mg/mL、50mg/mL)的消癌平与Hepa1-6肝癌细胞共同培养，MTT法检测药物处理后细胞的活性，细胞划痕实验检测细胞的移动能力。 2.动物水平：构建小鼠肝癌荷瘤模型，随机分为5组，每组15只。消癌平低、中、高剂量组分别给予消癌平注射液10g/(kg·d)、20g/(kg·d)、40g/(kg·d)；阳性对照组给予5-Fu 20mg/（kg·d)；阴性对照组给予等体积无菌生理盐水；均连续腹腔给药14天。称瘤重、脾重分别计算抑瘤率和脾指数；ELISA法检测血清可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）水平。结果： 1.细胞水平： 1.1光镜下观察：不同剂量的消癌平孵育Hepa1-6细胞后，细胞表现为不同程度的：伪足回缩、变圆，细胞分裂相减少，瘤巨细胞减少，部分细胞出现悬浮，随药物剂量增加上述表现越明显；对照组细胞形态多不规则，有较长的伪足，核分裂相多见。 1.2 MTT示：不同剂量的消癌平对小鼠肝癌Hepa1-6细胞的生长均有抑制作用，呈剂量、时间依赖性；各给药组与对照组比较，差异均有统计学意义(P0.01)，组间比较差异显著（P0.05）。 1.3细胞划痕实验：不同剂量的消癌平能够有效地阻止细胞向划痕处生长，且铺满划痕所需要的时间随消癌平剂量的增加而延长。 2.动物水平： 2.1脾指数：与阴性对照组相比，消癌平各剂量组脾指数明显提高，差异有统计学意义（P＜0.05）；而阳性对照组无明显差异（P＞0.05）。 2.2抑瘤率：消癌平注射液对H22荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用，低、中、高剂量组抑瘤率分别为：20.7%，31.6%，38.63%；与阴性对照组平均瘤重相比，差异有统计学意义(P0.05)；高剂量组与阳性对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。 2.3血清sICAM-1的表达：消癌平低、中、高剂量组的分泌量分别为：53.26±9.36ng/L，35.75±11.16ng/L，29.13±8.52ng/L；与阴性对照组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)；高剂量组与阳性对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）；与正常小鼠相比，各组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：消癌平可能通过抑制肝癌细胞的增殖及运动能力，降低血清中sICAM-1的表达达到抑制肿瘤的转移的目的。
【学位单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R285.5;R735.7
【部分图文】：

细胞,胞核,肝癌细胞,肝癌

图 1 肝癌 H e a p 1 -6 细胞AH e a p 1 -6 肝癌细胞（ × 2 0 0）图 A： He a p 1 - 6 肝癌细胞对照组（× 1 00 ）细胞形态多样，核质比大。 H e a p 1- 6 肝癌细胞核分裂象（ ×4 0 0 ）图 B：消癌平低剂量组（ 1 0m g / mL ）（× 2 0 0）作用 2 4h 后细胞伪足部分回缩 B