抗子宫内膜抗体对人早孕绒毛滋养细胞凋亡及FasL蛋白表达的影响

发布时间：2024-07-02 00:10

　　目的:探讨体外培养人早孕绒毛滋养层细胞在含有抗子宫内膜抗体(EmAb)血清环境中细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)及凋亡相关蛋白因子配体(factor associated suicide ligend,FasL)的表达情况。 方法:抽取在我院门诊就诊的EmAb阳性而其它与自然流产相关的免疫性抗体阴性的病人肘静脉血5ml用于EmAb(+)血清处理组,同法取5ml各相关免疫性抗体均阴性的正常育龄妇女血清用于EmAb(-)血清处理组。静脉血静置、离心后取上清-80℃保存备用,作为实验干预条件。无菌条件下获取正常妊娠6～8周早孕绒毛组织,经胰蛋白酶/DNA酶Ⅰ联合消化,Percoll密度梯度离心法对得到的细胞进行纯化并培养,将最终获得的CTs应用免疫细胞化学法对其进行纯度鉴定,并同时传代培养。将传1-2代的CTs分为2组:EmAb(+)血清处理组和EmAb(-)血清处理组,分别加入EmAb(+)血清处理和EmAb(-)血清处理并培养,于0h、48h、72h、96h,分别经过台盼蓝排出试验观察CTs的活力、计算细胞存活率;采用DNA末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(lebe...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1人绒毛细胞滋养层细胞原代培养,呈不规则多边形生长,排列紧密、分裂增殖明显(×400)

色示绝大多数贴壁生长的细胞CK7阳性,V9阴性,显微镜下计数5个视野中每100个细胞中的阳性细胞数为(92.60±1.56)%。见图1、图2。2.2　TUNEL法检测细胞凋亡率　DNA末端转移酶介导的原位缺口末端标记阳性染色检测绒毛细胞滋养细胞凋亡,镜下见各组凋亡的绒毛滋养细....

图5免疫细胞化学法检测人绒毛细胞

排列紧密，细胞边界清晰可见(x400)图3人绒毛滋养层细胞传代培养3h后，细胞贴壁，呈圆形或多边形(X400)

图3人绒毛滋养层细胞传代培养

图3人绒毛滋养层细胞传代培养3h后，细胞贴壁，呈圆形或多边形(X400)图4人绒毛滋养层细胞传代培养24h后，细胞贴壁，排列紧密，形态同原代细胞相似(x400)图5免疫细胞化学法检测人绒毛细胞细胞角蛋白7表达阳性，胞浆呈棕褐色(X400)

图4人绒毛滋养层细胞传代培

图3人绒毛滋养层细胞传代培养3h后，细胞贴壁，呈圆形或多边形(X400)图4人绒毛滋养层细胞传代培养24h后，细胞贴壁，排列紧密，形态同原代细胞相似(x400)图5免疫细胞化学法检测人绒毛细胞细胞角蛋白7表达阳性，胞浆呈棕褐色(X400)

本文编号：3999398