基于DNA自组装和链置换信号放大策略的蛋白质荧光传感研究

发布时间：2023-05-03 19:23

　　随着科学技术的飞速发展,人们的生活水平日渐提高,越来越重视自己的身体健康。在实际的生物学分析中,特别是在疾病的早期诊断、药物监测等方面,一些分子生物标志物发挥着重要作用,因此研究中需要去检测一些微量或超微量的分子或蛋白质,而开发高效、简便的检测方法对疾病的诊断、预测和治疗都具有重要意义。荧光生物传感器是一种高效的多目标检测仪器,具有操作简单、信号响应快、特异性强、均相体系等优点,在疾病诊断、环境监测、食品药品安全和科学研究等领域得到了广泛的应用。为了进一步提高生物标志物检测的水平将多种信号放大方法去结合荧光检测策略。本文利用DNA自组装和DNA链置换信号放大技术,构建了三种荧光生物传感器,对粘蛋白1(MUC1)、核因子kappa B p50(NF-kB p50)和干扰素-γ(IFN-γ)进行了高灵敏度、高选择性的检测。具体研究工作和成果总结如下:1.基于适配体探针构型变化的级联放大反应用于超灵敏荧光检测MUC1不同生物标志物的检测对不同类型疾病的诊断和治疗具有重要意义。根据之前的研究,MUC1在肿瘤细胞中的表达水平比在正常人上皮细胞的表达水平高。这种差异表明MUC1是疾病实际应用中血清...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 生物传感器
        1.1.1 生物传感器的概述
        1.1.2 生物传感器的分类
    1.2 荧光生物传感器概述
        1.2.1 荧光生物传感器的工作原理
        1.2.2 荧光生物传感器的分类
    1.3 荧光生物传感器的信号放大策略
        1.3.1 酶辅助的信号放大策略
        1.3.2 基于链置换的信号放大策略
        1.3.3 基于DNA自组装的信号放大策略
    1.4 本文研究思路
第二章 基于适配体探针构型变化的级联放大反应用于超灵敏荧光检测MUC1
    2.1 前言
    2.2 实验部分
        2.2.1 试剂与材料
        2.2.2 MUC1的放大荧光检测程序
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 MUC1荧光检测方法的原理
        2.3.2 MUC1荧光检测方法的可行性研究
        2.3.3 实验条件的优化
        2.3.4 传感器检测MUC1的分析性能研究
        2.3.5 传感器对MUC1选择性的研究
        2.3.6 实际样品中对目标蛋白的分析
    2.4 结论
第三章 银离子稳定的三链体DNA介导的催化发夹自组装放大检测NF-κb p50
    3.1 前言
    3.2 实验部分
        3.2.1 材料与试剂
        3.2.2 NF-κBp50荧光放大检测程序
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 荧光放大检测NF-κBp50的原理
        3.3.2 NF-κBp50检测方法的可行性研究
        3.3.3 实验条件的优化
        3.3.4 传感器对NF-κBp50检测的分析性能研究
        3.3.5 传感器对NF-κBp50检测的选择性研究
        3.3.6 实际样品中目标蛋白的分析
    3.4 结论
第四章 网状杂交链式反应用于组装DNA纳米结构和放大荧光检测细胞因子
    4.1 前言
    4.2 实验部分
        4.2.1 材料与试剂
        4.2.2 DNA自组装用于IFN-γ放大荧光检测的程序
        4.2.3 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
        4.2.4 原子力显微镜成像
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 IFN-γ荧光检测的机理
        4.3.2 IFN-γ放大检测体系的可行性研究
        4.3.3 实验条件的优化
        4.3.4 传感器的分析性能研究
        4.3.5 传感器的选择性研究
        4.3.6 传感器对实际样品的分析
    4.4 结论
参考文献
在学期间的研究成果
致谢



本文编号：3807136