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人白蛋白小分子荧光探针DDABP的属性表征与医学应用研究

发布时间:2022-01-20 17:51
  背景和目的:人白蛋白(human albumin,HA)是人体内浓度最高的血浆蛋白,血浆中浓度为35-55g/L,占总血浆蛋白的50%以上。HA仅在肝脏中合成,正常人以12-25g/d的速率合成。多项研究表明体液中的HA含量的变化与多种疾病(如糖尿病、肾病、和肝损伤)的发生、发展密切相关。因此,精确检测体液中白蛋白含量在临床诊断和生物医学研究中意义重大。本论文以HA为靶标分子,通过筛选获得HA特异性荧光探针底物1,3-二氯-7-羟基-9,9-二甲基-2(9H)-吖啶酮甲基联苯甲酸酯(DDABP),并建立相应的荧光分析方法,以用于复杂体系中白蛋白的快速检测。筛选的新型探针分子DDABP及相应的分析方法为探索白蛋白分子的体内功能、代谢规律及在相关疾病中的作用提供参考。方法:1.利用荧光分析和紫外分光光度法考察探针与白蛋白反应的光谱变化。2.通过表型筛选实验考查探针的选择性,测量定量下限值评估探针的灵敏性,小分子离子干扰实验考察探针的生物稳定性。3.基于液相质谱的蛋白质组学方法考察探针的识别机理。4.利用探针构建的荧光分析方法检测细胞上清和人血浆中白蛋白,并与其它方法比较。5.应用荧光成像技... 

【文章来源】:郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】:57 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

人白蛋白小分子荧光探针DDABP的属性表征与医学应用研究


四个探针化合物与多种水解酶和蛋白在磷酸盐缓冲体系中反应60min后荧光强度变化

血浆蛋白,探针,水解酶,荧光强度


图 3.2 探针 DDABP 与多种血浆蛋白和水解酶反应后荧光强度的变化 荧光探针与 HA 反应的光谱特征探针在 HA 存在条件下光谱的变化如下图 3.3 所示,探针 DDABP 在缓几乎无荧光,但在体系中加入 HA 后在 662 nm 处逐渐有荧光产生,且现很好的线性关系。相应的,如图 3.4 所示探针 DDABP 在 430nm 处有峰,但用 HA 处理后,在 646nm 处出现了一个新的吸收峰。同样,这的变化也使溶液从黄色变成蓝色,暗示探针也作为 HA 的“裸眼”指示

探针,荧光光谱,强度


图 3.2 探针 DDABP 与多种血浆蛋白和水解酶反应后荧光强度的变化3.1.2 荧光探针与 HA 反应的光谱特征探针在 HA 存在条件下光谱的变化如下图 3.3 所示,探针 DDABP 在缓冲体系中几乎无荧光,但在体系中加入 HA 后在 662 nm 处逐渐有荧光产生,且与时间呈现很好的线性关系。相应的,如图 3.4 所示探针 DDABP 在 430nm 处有一个吸收峰,但用 HA 处理后,在 646nm 处出现了一个新的吸收峰。同样,这种吸收谱的变化也使溶液从黄色变成蓝色,暗示探针也作为 HA 的“裸眼”指示剂。

【参考文献】:
期刊论文
[1]比较白蛋白与低分子羟乙基淀粉代血浆对自发性细菌性腹膜炎的作用:一项随机非盲试点研究[J]. Fernández J.,Monteagudo J.,Bargallo X.,李翔.  世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册). 2006(01)



本文编号:3599262

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