基于聚谷氨酸为骨架的聚乙烯亚胺基因传递系统的构建及体外性能研究

发布时间：2022-04-26 18:38

　　目的:构建高效率低毒性的基因载体是基因治疗成功的关键。本研究目的是设计一种以“零代聚酰胺-胺”为内核、聚谷氨酸接枝小分子PEI为侧链的共聚物G0-b-PLG-g-PEI（PGLP）,并且评估该聚合物作为基因载体的理化性质和生物性能。方法:本文通过三光气法制得L-谷氨酸-γ-苄酯-N-羧酸酐（BLG-NCA）,以PAMAM G0作引发剂引发BLG-NCA发生开环聚合反应,制得聚酰胺-胺-b-聚谷氨酸苄酯（G0-b-PBLG）,以PEI 423为氨解剂对G0-b-PBLG进行氨解,制得三嵌段共聚物G0-b-PLG-g-PEI（PGLP）,采用核磁共振氢谱（~1H NMR）对聚合物PGLP的结构进行表征。通过静电结合作用制备PGLP/DNA自组装基因传递系统,琼脂糖凝胶电泳实验考察PGLP对DNA的压缩能力和保护能力;动态光散射法测定PGLP/DNA复合物的粒径与电位;采用CCK-8试剂盒和溶血实验评估聚合物PGLP与PGLP/DNA复合物的安全性;流式细胞仪测定PGLP/DNA复合物的体外转染能力;共聚焦显微镜观察细胞对基因的摄取,以及DNA在细胞内的分布情况。结果:~1H NMR图谱证实... 

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略图表
第一章 前言
    1 研究背景
    2 本研究的目的、意义及内容
第二章 PGLP的合成与表征
    1 试剂与仪器
    2 试验方法
    3 结果与讨论
    4 本章小结
第三章 PGLP/DNA复合物的制备及性能研究
    1 试剂与仪器
    2 试验方法
    3 结果与讨论
    4 本章小结
第四章 PGLP/DNA复合物的细胞毒性和生物相容性研究
    1 试剂与仪器
    2 试验方法
    3 结果与讨论
    4 本章小结
第五章 PGLP/pEGFP-C3 复合物的体外细胞转染研究
    1 试剂与仪器
    2 试验方法
    3 结果与讨论
    4 本章小结
全文总结
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]GGI/MDR1 siRNA逆转A549/DDP细胞多药耐药的研究[J]. 王子瑞,白凤,张小英,吴佳敏,郭羚,利智,冯敏.  药学学报. 2017(02)
[2]Membrane immunoglobulin expressed by retroviral vector gene transfer mimics partial function of the B-cell receptor in vivo[J]. Jing Lu,Feng Chen,Zhen Xu,Lingling Zhang,Peng Xu,Depei Liu,Chihchuan Liang.  Science China（Life Sciences）. 2016(01)



本文编号：3648520