秦皇岛产区酿酒葡萄病毒病的侵染情况调查及RT-PCR检测

发布时间：2020-04-06 20:47

【摘要】：中国至今已报道14种葡萄病毒病,葡萄病毒病的发生严重制约了我国葡萄产业的发展。秦皇岛是我国重要酿酒葡萄栽培基地之一,有关葡萄病毒病在秦皇岛各葡萄种植区的发病情况罕有报道。为此,本论文主要开展了以下三方面研究:第一,调查了秦皇岛产区酿酒葡萄病毒病田间自然发病情况;第二,对疑似葡萄病毒病症状样品进行RT-PCR检测;第三,对本产区葡萄卷叶病毒3和灰比诺病毒的分离物进行基因序列分析。明确秦皇岛产区感染葡萄病毒病的种类,为该产区葡萄病毒病的防控奠定基础。研究结果主要有以下几点:1.本研究对秦皇岛产区5个葡萄园8个酿酒品种感染葡萄扇叶病(GFLV)、葡萄卷叶病(GLRaVs)、葡萄病毒B(GVB)和葡萄斑点病毒(GFKV)的情况进行田间调查。结果发现,(1)GFLV和GLRaVs在秦皇岛葡萄产区普遍存在,且GLRaVs发病率最高;(2)GVB仅在朗格斯酒庄葡萄种植园有发现;(3)在调查的葡萄园中均未发现GFKV表现症状。(4)各葡萄种植园和品种间感染GLRaVs的情况不同,耿庄葡萄种植园GLRaVs发病率较高于其它4个种植园,‘美乐’和‘西拉’两个品种GLRaVs的感染率较高。2.对秦皇岛产区7种病毒病的疑似症状样品进行了RT-PCR检测,在所检测的样品中,检出GFKV、葡萄灰比诺病毒(GPGV)、GLRaV3和GVB四种病毒,其中GFKV、GPGV和GLRaV3在所有调查葡萄园均有检出,总检出率分别为49.9%、59%和47.3%。GLRaV3在‘小味儿多’品种的检出率最高,为82.2%;GFKV在‘小味儿多’品种的检出率最高,为84.4%;GPGV在‘小白玫瑰’品种的检出率最高,为93.3%;GVB在‘霞多丽’品种的检出率最高,为6.6%。此外,供试品种检测出有含GLRaV3和GFKV二重复合侵染。在单一病毒RT-PCR检测的基础上,建立了GLRaV3和GFKV双重RT-PCR检测体系,并优化了检测条件。3.对获得的阳性样品的GLRaV3-HSP70和GPGV-MP基因测序分析,结果表明,本研究GLRaV3-QHD分离株与国内外已报道分离株的HSP70基因核苷酸序列同源性在96.3%~99.3%;GPGV-QHD分离株与国内外已报道分离株的MP基因核苷酸序列同源性在93.3%~98.4%。
【图文】：

卷叶,症状,酿酒葡萄,卷叶病

酿酒葡萄红色品种感染葡萄卷叶病之后初期叶脉间出现小的红色斑点（图2-1 B），以后红色斑点逐渐扩大，呈红叶状，后期叶片上除叶脉保持绿色外，其余部分均为红色（图 2-1 C）。非红色品种的酿酒葡萄感病后，叶片除微卷外，还会表现为黄花褪绿（图 2-1 D）。图 2-1 酿酒葡萄卷叶病症状Fig. 2-1 Symptoms of leaf roll disease of wine grapeA.‘美乐’(红色品种)卷叶症状；B.‘美乐’卷叶初期症状；C.‘美乐’卷叶后期症状；D.‘小芒森’(白色品种)卷叶症状。A. Leaf roll Symptoms of ‘Merlot’(Red variety); B.Leaf roll initial Symptoms of ‘Merlot’; C. Leafroll late Symptoms of ‘Merlot’; D.Leaf roll Symptoms of ‘Petit Manseng’（White variety）.2.4.2 秦皇岛酿酒葡萄扇叶病和斑点病田间发病症状河北秦皇岛 5 个葡萄种植园扇叶病表现出 2 种症状。l 型（扇叶症状）：叶片严重变形，呈扇状，叶缘锯齿增多，且长短不齐，叶片变小，叶身不对称，叶片褪绿（图 2-2 A）。II 型（花叶形症状）：叶片上有边缘不清晰、形状不规则的黄色斑点，颜色浓淡不一（图 2-2 B）。葡萄斑点病在欧洲葡萄和大多美洲葡萄砧木上症状潜隐，而在沙地葡萄上表现明显。在对河北秦皇岛 5 个酿酒葡萄园进行田间病毒调查时，8 个葡萄品种的叶片上没有发现明显的葡萄

扇叶,酿酒葡萄,症状,花叶

图 2-2 酿酒葡萄扇叶病症状Fig. 2-2 Symptoms of fan leaf disease of wine grapeA.‘西拉’扇叶型症状；B.‘美乐’花叶型症状toms of Grapevine fan leaf type of ‘Shiraz’；B. Symptoms of Grapevine mo‘Merlot’皇岛酿酒葡萄栓皮病田间发病症状查的 5 个酿酒葡萄园中，，仅朗格斯酒庄‘马瑟兰’葡萄品种表枝蔓和叶片上均表现栓皮病症状。葡萄栓皮病初期叶片变为黄叶片反卷，且叶肉和叶脉全变为红色。图 2-3 为‘马瑟兰’品
【学位授予单位】：河北科技师范学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S436.631.19

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