三种植物病毒外壳蛋白的原核表达、多克隆抗体制备及检测应用

发布时间：2024-02-20 00:10

　　现代植物病毒学的发展历经了几百年,新时代的农业生产要求越来越高,但是形势却趋于复杂。这要求植物病毒检测手段以及操作方法要快速、灵敏、准确与简便。其中血清学检测方法就是众多检测方法中的一种行之有效的检测技术。本研究针对目前国内发生较为频繁的三种植物病毒病,利用病毒外壳蛋白原核表达的方法制备多克隆抗体,并建立了相应的病毒检测体系,以用于后续三种病毒的检测鉴定工作。番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)是长线形病毒科(Closteroviridae)毛形病毒属(Crinivirus)的成员。其基因组是二分体线形正单链RNA,外壳蛋白基因位于RNA2上。ToCV寄主种类多种多样且覆盖范围广泛,全世界范围内都曾暴发流行,造成严重的经济损失。由于其传毒媒介的广泛性,以及感病植株初始症状的不明显,导致了其难以防治。鉴别ToCV的方法有多种,大致有目测法、RT-PCR检测方法、组织印迹杂交法及血清学检测方法。本研究利用山东寿光田间采集的病样,利用RT-PCR的方法将扩增的病毒外壳序列与载体连接来构建番茄褪绿病毒外壳蛋白基因表达载体,用原核表达纯化过的重组蛋白作为抗原,多...

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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图２－ｌ?ＢＣＭＶ基因组结构图??：－

会产生一个比较大的多聚蛋白的前体，经过加工就会形成功能多样的成熟蛋白。从５＇??端至?３，端依次编码?Ｐｌ、ＨＣ－Ｐｒｏ、Ｐ３、６Ｋ１、Ｃｌ、６Ｋ２、ＮＩａ－ＶＰｇ、ＮＩａ－Ｐｒｏ、Ｎｉｂ、ＣＰ??的蛋白，结果如图２－１所示。??８??

图３－１辣椒感病图

以参考阁３－１所示。在一些植株上的嫩茎会出现有坏死条纹，症状有点像被ＰＢＮＶ感??染般。如若是番茄被感染，会出现的沾状表观叶片和果实上会Ｍｉ现褪绿和坏死斑。感??病的番茄会从生长尖端开始坏死，芽的部分开始坏死，症状如图３－２所示，果实变色，??表面上有圆心环斑。??關＿??图３－....

本文编号：3903542