川贝母（Fritillaria cirrhosa）遗传毒性及其分子机制探究

发布时间：2023-12-27 19:10

　　川贝母(Bulbus of Fritillaria cirrhosa,BFC)是《中华人民共和国药典》中收录的一味著名的传统中药材,具有悠久的药用历史和出色的止咳、化痰、平喘作用。药物的遗传毒性是指药物直接或间接干扰遗传物质(DNA和染色体)完整性的能力。DNA损伤和染色体不稳定(CIN)可以造成细胞死亡、组织和器官衰老。大量证据表明,DNA损伤以及CIN与癌症、神经退行性疾病和心血管疾病等疾病的发生风险显著相关。然而,BFC是否具有遗传毒性仍然缺乏深入的研究。本研究以人正常结肠粘膜上皮NCM460细胞为实验模型,通过(1)胞质阻断微核试验分析CIN[以微核(MN)、核质桥(NPB)和核芽(NB)发生率作为评价指标];(2)以有丝分裂异常分析试验检测有丝分裂错误[以染色体错误排布(CMA)、多极排布(MPA)、滞后染色体(LC)、染色质桥(CB)和多极分离(MPS)作为评价指标];(3)以诺考达唑胁迫试验分析可防止CIN的纺锤体组装检查点(SAC)活性;(4)以胸苷、诺考达唑和细胞松弛素B进行细胞同步化分析;(5)以RT-qPCR进行基因转录表达分析,探究了 BFC及其活性成分贝母甲素...

【文章页数】：184 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
第一章 引言
    1.1 贝母
    1.2 药物毒理学概览
    1.3 实验目的
第二章 文献综述
    2.1 有丝分裂
    2.2 染色体不稳定及其发生机制
    2.3 染色体不稳定与肿瘤
第三章 实验材料和方法
    3.1 试验用试剂的配制
    3.2 细胞培养
    3.3 川贝母提取物和贝母生物碱
    3.4 台粉蓝拒染法
    3.5 胞质阻断微核试验
    3.6 有丝分裂指数和有丝分裂错误分析
    3.7 SAC活性测定
    3.8 细胞同步化
    3.9 实时定量PCR
    3.10 胞质分裂失败的測定
    3.11 数据统计及作图
第四章 川贝母诱发染色体不稳定
    4.2 引言
    4.3 结果
    4.4 讨论
    4.5 结论
第五章 川贝母降低纺锤体组装检查点活性
    5.2 引言
    5.3 结果
    5.4 讨论
    5.5 结论
第六章 川贝母诱发胞质分裂失败
    6.2 引言
    6.3 结果
    6.4 讨论
    6.5 结论
第七章 川贝母诱发纺锤体多极性
    7.2 引言
    7.3 结果
    7.4 讨论
    7.5 结论
第八章 贝母生物碱促进染色体不稳定
    8.2 引言
    8.3 结果与讨论
    8.4 结论
第九章 总结与展望
    9.1 总结
    9.2 创新点
    9.3 不足
    9.4 展望
参考文献
在学期间发表论文和所获奖励
致谢



本文编号：3875731