丹参miR156前体序列的克隆及功能研究

发布时间：2024-04-11 20:39

　　丹参(Salvia miltiorrhizaBunge),唇形科多年生药用植物,其根部是我国传统大宗药材,在治疗心脑血管疾病、组织损伤、血脂升高等方面具有很好的疗效,被誉为“药用模式植物”。现代药理学研究证实,丹参的主要药用成分可分为以酚酸类为代表的水溶性化合物和以丹参酮类为主的脂溶性物质。miR156是一类进化非常保守的非编码小RNA,是植物中目前已知的唯一年龄因子。已有研究表明,miR156不仅调控植物的生长发育(包括生殖转型、形态建成、雌配子发育、表皮毛发育、侧根生长、开花时间、生物量),同时也影响植物抗性以及次生代谢产物的积累。本论文以“药用模式植物”丹参为主要研究对象,从中克隆得到miR156前体序列—Sm-MIR156a,通过对Sm-MIR156a进行过表达和干涉研究,探究miR156对丹参生长及次生代谢含量的影响。主要研究内容及结果如下:1、基于保守的成熟Sm-miR156序列,从丹参基因组Survey数据库中搜索并克隆得到长度为465bp的丹参miR156前体序列—Sm-MIR156a;生物信息学分析发现,Sm-MIR156a的可形成稳定的二级茎环结构;以不同植物miR...

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１丹参細－Ｍ７ｉ＾５（５ａ扩增产物检测??Ｍ：?ＤＬ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１：以ＤＮＡ为模板的扩增产物；２：以ｃＤＮＡ为模板的扩增产物??

运用软件Ｃｌｕｓｔａｌ?Ｗ对Ｍ／Ｗ５６ａ进行多序列比对分析，比对结果显示Ｍ／幻５仏??在不同物种间有很高的保守性，以ＭＥＧＡ５．２软件，通过Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－Ｊｏｉｎｉｎｇ方法，??构建不同物种ＭＷ？７５如系统进化树（图２－２）。进化树结果显示，Ｍ／／Ｊ７５如在各??物种间进化非....

图２－２?如系统进化树??Ｆｉｇ．?２－２?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?Ｓｍ－ＭＩＲｌ?５６ａ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｗｉｔｈ?ｏｔｈｅｒ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ．??

ｆ?：：?■??（ｂｐ）?ｔ—ｒａｕｍ??图２－１丹参細－Ｍ７ｉ＾５（５ａ扩增产物检测??Ｍ：?ＤＬ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１：以ＤＮＡ为模板的扩增产物；２：以ｃＤＮＡ为模板的扩增产物??Ｆｉｇ．?２－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?Ｓｍ－ＭＩＲｌ５....

图２－４丹参ｍｉＲ?１５６成熟序列碱基保守性分析??Ｆｉｇ．２－４?Ｓ．?ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ?ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｍｉＲ１５６??

能为－７５．００?ｋｃａｌ／ｍｏｌ，能形成稳定的茎环结构，ｍｉＲ１５６／ｍｉＲ１５６＊双链结构区分别位??于茎环结构的两臂，ｍｉＲ１５６成熟序列（５＇－ＵＧＡＣＡＧＡＡＧＡＧＡＧＵＧＡＧＣＡＣ－３＇）位??于茎环结构３１端（图２－３箭头所指位置）。在小ＲＮＡ数据库ｍｉＲｂａｓｅ?....

图２－８?Ｓｗ－Ｍ／及／５如在丹参相同组织不同时期的相对表达水平??Ｒｌ、ＳＩ、Ｌ１代表１个月丹参幼苗的根、茎、叶；Ｒ３、Ｓ３、Ｌ３代表３个月丹参幼苗的根、茎、??叶??

基?ｗｒｔｉｇｔｍ?ｍｗ?ｔｏｎ＊??图２－７?在丹参同组织不同部位的相对表达水平??注：＊、＊＊、＊＊＊表示有显著差异（尸＜０．０５、０．０１、０．００１）??Ｆｉｇ．?２－７?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?Ｓｍ－ＭＩＲｌ?５６ａ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒ....

本文编号：3951115