STTM-OsmiRNA载体构建及水稻遗传转化

发布时间：2024-05-08 20:20

　　水稻是全球主要的粮食作物之一,提高水稻的产量和品质,不仅对于国家粮食安全具有重要的意义,而且也是人们健康的需要。水稻具有极其广泛的适应性,在我国东北到西南的广大地区均有种植,这表明水稻对环境具有广泛的适应性。水稻籽粒产量属于复杂的数量性状,不仅决定于产量性状本身,而且植株的生长发育也对籽粒产量具有重要的影响。虽然一些调控水稻籽粒和植株生长发育的基因被分离和克隆,在一定程度上解析了水稻产量形成的分子机制,但microRNA(miRNA)调控水稻生长发育和产量形成的研究较少。miRNA属于小分子非编码RNA,在植物生长发育的各个阶段及产量形成均具有重要的调控作用。水稻MIR319家族包含两个成员,相关研究表明该miRNA家族不但参与了植物生长发育过程中的生物与非生物胁迫应答,而且与植物的育性相关。本研究采用短片段靶基因模拟技术(STTM)敲除OsmiR319家族,通过农杆菌介导的水稻愈伤组织的遗传转化进行水稻转基因,进而筛选阳性转基因突变体,并对OsmiR319的功能进行初步分析。本研究的主要研究结果:(1)本研究采用引物扩增的方法构建STTM319,STTM390,STTM397,STT...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1miRbase中miRNA前体及成熟序列

中共发现了16个miRNA，依次分别命名为miR156至miR171，丰富了植物基因的研究领域。目前，已在不同的物种发现了大量的miRNA，并且在miRNA数据库释版本中，都会增加大量的miRNA前体、成熟序列等（图1），在miRNA数据库最新ase....

图2植物miRNA转录、翻译以及作用机制[21]

物合成IR基因转录并经过一系列的剪切加工而成的小分子RNAAPolymeraseⅡ，PolⅡ）以及转录因子的共同作用下，转3′端PloyA尾巴的MIRNA初级转录本（Primary-miRNDicer-LIke1）[12]蛋白的剪切加工作，生成带有茎环结pre....

图3水稻miR319家族Fig.3Thefamilyofosa-miR319

可以分别加工为3个成熟的miR319(a-c)。在miRBase20中，水稻miR31个miRNA前体位于位于1号染色体，分别是MIR319a和MIR319b，可以分miR319(a，b)。而在miRBase21中，Osa-miR319的2....

图3STTM319结构及亚克隆载体示意图

14图3STTM319结构及亚克隆载体示意图[134]Fig3.STTMPCRconstructionstrategyandtheSTTMstructureTTM319低表达miR319载体引物设计究根据Tang等[134]构建STTM载体方法....

本文编号：3967774