饲料磷脂源及水平对拟穴青蟹（Scylla paramamosain）早期幼蟹生长、体组成及抗氧化能力的影响

发布时间：2020-04-20 16:22

【摘要】：磷脂作为一类重要的复合脂,是水产动物饲料中重要的营养物质之一。虽然水产动物对磷脂的需求量一般较低,但是磷脂在鱼类和甲壳类的生长、发育、免疫和生殖等方面都扮演重要的角色,尤其是在它们早期生命阶段。国内外专家学者已经在许多水产动物中开展了磷脂的营养研究,但是关于拟穴青蟹(Scylla paramamosain)的磷脂营养研究还未见报道。拟穴青蟹是我国最主要的海水养殖蟹类,但是由于苗种繁育起步较晚,营养研究缺乏导致其苗种存活率低种质质量不高等问题,并且目前拟穴青蟹的养殖还依赖于生物饵料。据此,本论文通过系统研究饲料中添加不同磷脂源以及水平对拟穴青蟹早期幼蟹生长、存活、体组成、脂质代谢、抗氧化和渗透调节的影响,获取拟穴青蟹早期幼蟹适宜的饲料磷脂源和水平,为拟穴青蟹人工颗粒饲料的研发提供一定的理论参考。主要实验内容包括以下两方面:(1)采用单因素实验方法,设计4组等氮等脂的饲料用来探究饲料大豆磷脂水平(0%,1%,2%和4%磷脂添加)对拟穴青蟹早期幼蟹生长性能、体组成、脂质代谢、抗氧化能力以及渗透调节能力的影响。实验进行8周,每个处理组设置3个平行每个平行28只拟穴青蟹(初重为42.23±0.21mg)。实验结束后,所有处理组都获得了较高水平的存活率(86.90%-92.86%),并且所有处理组的存活率没有出现显著性差异。饲喂添加2%大豆磷脂饲料的拟穴青蟹获得了最高的体重增加(WG)和特定生长率(SGR),蜕壳频率(MF)没有受到不同饲料大豆磷脂添加的影响。另外,全蟹的脂肪和长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)水平随着饲料中大豆磷脂水平的上升而显著上升。在肝胰腺中,饲喂添加0%大豆磷脂饲料的拟穴青蟹获得了显著高的丙二醛(MDA)含量。与饲喂0%和4%饲料的大豆磷脂组的拟穴青蟹相比,在饲喂2%饲料大豆磷脂的拟穴青蟹中获得了显著高的超氧化物歧化酶(SOD)活性。此外,Na~+/K~+-ATPase(NKA)基因的mRNA表达水平出现了显著的下调随着饲料中大豆磷脂的添加超过2%。基于WG的二阶多项式回归分析,拟穴青蟹早期幼蟹饲料中大豆磷脂的最适添加水平为2.37%。此外,饲喂添加2%大豆磷脂饲料的拟穴青蟹获得了较强的抗氧化能力。(2)采用单因素实验方法,探究饲料中蛋黄卵磷脂水平对拟穴青蟹早期幼蟹存活、生长、体组成、脂质代谢以及抗氧化能力的影响。总共420只拟穴青蟹(初重为8.14±0.30mg)随机分配到5个处理组中(每个处理组3个重复)饲喂包含不同蛋黄卵磷脂的饲料(蛋黄卵磷脂水平分别为0%(EL0),1%(EL1),2%(EL2),3%(EL3)和4%(EL4))八周。饲喂3%蛋黄卵磷脂的拟穴青蟹获得了最高的存活率(92.86%)。显著高的末重(FBW),增重率(WG)和特定生长率(SGR)也出现在EL3组的拟穴青蟹中,并且与EL2组没有统计学差异。EL2组拟穴青蟹获得了最高的蜕壳频率(MF)和蜕皮激素受体基因mRNA表达。此外,随着饲料中蛋黄卵磷脂水平的升高,拟穴青蟹的体脂肪水平也不断增加。并且,在EL2组获得了高水平的n3高不饱和脂肪酸/n6高不饱和脂肪酸比例。同时,EL2组拟穴青蟹的脂肪酸结合蛋白(FABP)基因mRNA表达水平也显著高于其他组。而EL4组拟穴青蟹的脂肪酸合成酶(FAS)基因mRNA表达水平显著低于其他组。在肝胰腺中,丙二醛(MDA)含量随着饲料中蛋黄卵磷脂水平上升而下降。在EL2和EL3组的拟穴青蟹中检测到较高水平的超氧化物歧化酶(SOD)活性。基于SGR的二阶多项式回归分析,在拟穴青蟹早期幼蟹饲料中添加2.56%的蛋黄卵磷脂水平能够获得最好的生长。综上,本研究通过两个独立实验探究了饲料大豆磷脂与蛋黄卵磷脂对拟穴青蟹早期幼蟹生长、体组成、脂质代谢以及抗氧化能力的影响。适宜的饲料磷脂添加显著提高了拟穴青蟹早期幼蟹的存活率、生长和抗氧化能力。另外饲料磷脂添加还会影响拟穴青蟹早期幼蟹的脂质代谢,提高其体脂肪与长链多不饱和脂肪酸水平。基于二阶多项式回归分析拟穴青蟹早期幼蟹的磷脂需求在2.37%-2.56%。两种磷脂源对拟穴青蟹早期幼蟹的影响差异并不显著,综合考虑认为大豆磷脂是较为适合的磷脂源。
【图文】：

甘油磷脂,结构通式

hospholipid）是包含磷的所有脂类物质的总称，主要包和鞘磷脂。磷脂在生物体内分布广泛，是生物膜的主要医疗、工业生产等领域具有广泛的应用。的结构与分类的主要结构如图 2-1 所示，甘油磷脂具有疏水的脂肪酸脂基团，特殊的性质使得磷脂在生物体内发挥着重 R1 为脂肪酸，其中 R1 位置通常结合的是饱和脂肪酸置通常结合多不饱和脂肪酸[22]。X 处结合不同的基团主要包括磷脂酰胆碱（phosphatidyl choline, PC）、磷ylethanolamine,PE）、磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserisphatidyl inositol, PI）、磷脂酰甘油（phosphatidyl glyce（diphosphatidylglycerol）等。

磷脂酶,位置,磷脂,溶血磷脂

图 2-2 磷脂酶的作用位置Fig 2-2 Targeting sites of different Phospholipases合成降解过程在哺乳动物中有较为详细的研究[24]，在鱼类和缺乏，但是一般认为水产动物的磷脂代谢过程与哺乳动物一渶的研究中已经发现磷脂合成所需要的所有酶和蛋白质，并中也发现了磷脂合成所需要的所有酶和蛋白质的基因[24]。脂的消化吸收和转运关于水产动物磷脂消化吸收以及转运的研究较少，一般认为类似。在鱼类的研究中，磷脂在肠道中被胰腺分泌的磷脂酶酸和溶血磷脂然后被肠道黏膜细胞吸收[27]。目前在缺乏胰腺酶 A2 的具体来源。另外在海水鱼中的研究还发现磷脂酶 A口后数天才被检测到[28]。被降解为溶血磷脂和游离脂肪酸后将与其他脂肪降解的产，然后扩散到肠黏膜并被肠细胞所吸收[29]。但是在鱼的血浆
【学位授予单位】：浙江海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S968.251

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