藻蓝蛋白分子大小对其紫外吸收和荧光强度的影响探究

发布时间：2024-02-07 02:06

　　藻蓝蛋白荧光强度的控制对于荧光探针在疾病治疗中的有效应用具有重要意义,本研究对藻蓝蛋白的分子大小对其紫外吸收和荧光强度的影响进行了探究。在SB9缓冲液中,将等量的藻蓝蛋白在9种梯度浓度1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)的作用下交联,琼脂糖凝胶电泳出现明显的分离条带。随后,检测这些交联的藻蓝蛋白的紫外线吸收和荧光强度。结果表明:与对照相比,EDC浓度越小,形成的交联藻蓝蛋白分子量越小;而随着交联藻蓝蛋白分子量减小,其最高吸收峰向波长较长的区域移动(称为红移),并且其荧光强度增加。另外,用1 mol/mL的胰蛋白酶处理藻蓝蛋白小分子,每隔一段时间检测其紫外吸收和荧光强度,得出动力学吸收光谱和动力学荧光光谱。结果表明:与对照相比,酶切时间越长,最高吸收峰波长红移,荧光强度越弱。随后,对酶切的藻蓝蛋白进行琼脂糖凝胶电泳,观察到明显的分离带;聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测到明显的荧光强度差异。以上结果证明藻蓝蛋白被酶切成小分子。综上,藻蓝蛋白的分子大小对其紫外吸收和荧光强度有显著影响,值得更多的研究关注。

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【部分图文】：

图3酶切藻蓝蛋白紫外吸收光谱

图2藻蓝蛋白与EDC交联后的紫外吸收光谱图图4酶切藻蓝蛋白琼脂糖凝胶电泳

图4酶切藻蓝蛋白琼脂糖凝胶电泳

图3酶切藻蓝蛋白紫外吸收光谱图5聚丙烯酰胺凝胶电泳紫外荧光显色

图5聚丙烯酰胺凝胶电泳紫外荧光显色

图4酶切藻蓝蛋白琼脂糖凝胶电泳在探究小分子藻蓝蛋白的紫外吸收和荧光强度变化时，藻蓝蛋白经胰蛋白酶酶切后的小分子也同样影响了藻蓝蛋白的吸光度、峰位置、荧光强度，影响程度的大小与酶切时间长短有关。酶也是一种蛋白质，很多条件选择不当也会使其结构改变从而导致失活，比如酶切时间，酶切温度....

图1藻蓝蛋白与EDC交联后的琼脂糖凝胶电泳

对9个实验组(不同浓度的EDC与0.001mg/L的藻蓝蛋白交联)和1个藻蓝蛋白对照组进行紫外吸收检测和荧光检测(图2)。交联后藻蓝蛋白最大特征吸收峰在620nm左右。由1～9号样品可知，EDC浓度越小即分子量越小最大吸收峰红移，吸光度增大，荧光强度越强，最大发射峰蓝移。不同....

本文编号：3896577