温度和亚硝酸盐对草鱼肾细胞、血细胞及肝细胞抗氧化体系的影响
发布时间：2024-04-03 02:35
为探究温度和亚硝酸盐对草鱼(ctenopharyngodon idellus)组织细胞的应激作用及其细胞水平的反应机理,本文进行了以下三个方面的研究：(1)温度对草鱼肾细胞(CIK)的氧化与抗氧化指标及抗氧化物酶相关基因表达水平的影响；(2)亚硝酸盐对草鱼离体血细胞的胞内氧化及抗氧化指标、血红蛋白及高铁血红蛋白含量、及抗氧化物酶相关基因表达水平的影响;(3)亚硝酸盐对草鱼离体肝细胞的抗氧化物酶活性的影响。 在研究(1)中采用的实验细胞为来自华中农业大学水产学院的CIK传代细胞。在研究(2)和(3)中采用体质量为(65.8±5.5)g的草鱼幼鱼为材料,在无菌条件下提取草鱼血细胞并制备离体肝细胞,设置3个亚硝酸盐暴露组(1.0mg/L、10.0mg/L、100.0mg/L)和1个空白对照组(0mg/L组),各实验组设置3个重复,离体血细胞实验分别暴露0h、3h、6h、12h、24h,离体肝细胞实验分别暴露0h、6h、12h、24h、48h、96h。研究结果如下： 1.温度对草鱼肾细胞的氧化应激水平的影响 在急性温度变化下,无论升高温度4℃或者降低温度4℃都会导致胞内氧化应激水平发生改变,这...
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
第一章 文献综述
1.1 温度和亚硝酸盐对水生动物的抗氧化系统和组织器官的影响
1.2 氧化应激的产生与活性氧对水生动物的影响
1.3 氧化应激与水生动物的非特异性免疫反应
1.4 氧化应激对水生动物基因表达水平的作用机制及其影响
1.5 研究目的与意义
第二章 温度对草鱼肾细胞的氧化应激水平的影响
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 草鱼肾细胞的培养
2.2.2 草鱼肾细胞的处理
2.2.3 活性氧的检测
2.2.4 线粒体跨膜电位的检测
2.2.5 抗氧化相关指标的检测
2.2.6 蛋白质及脂质氧化损伤的检测
2.2.7 抗氧化物酶基因表达的定量PCR检测方法
2.3 数据处理
2.4 结果与分析
2.4.1 温度对CIK细胞内活性氧的影响
2.4.2 氧化损伤指标
2.4.3 抗氧化物酶活性
2.4.4 氧化还原状态
2.4.5 抗氧化酶基因的转录水平
2.5 讨论
第三章 亚硝酸盐对草鱼血细胞的氧化应激水平的影响
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 离体血细胞的培养
3.2.2 实验设计
3.2.3 血细胞内活性氧的检测
3.2.4 血细胞线粒体跨膜电位的检测
3.2.5 血细胞内抗氧化防御相关指标的检测
3.2.6 血细胞内脂质损伤水平及血红蛋白和高铁血红蛋白的检测
3.2.7 血细胞内抗氧化物酶基因表达的定量PCR检测方法
3.3 数据处理
3.4 结果与分析
3.4.1 亚硝酸盐对血细胞的活性氧的影响
3.4.2 亚硝酸盐对血细胞的氧化损伤状态指标的影响
3.4.3 亚硝酸盐对血细胞内血红蛋白和高铁血红蛋白含量的影响
3.4.4 亚硝酸盐对血细胞内抗氧化相关酶活的影响
3.4.5 亚硝酸盐对血细胞内氧化还原状态指标的影响
3.4.6 亚硝酸盐对血细胞内抗氧化物酶基因表达的影响
3.5 讨论
第四章 亚硝酸盐暴露对草鱼离体肝细胞氧化应激水平的影响
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 离体肝细胞的获取
4.2.2 实验设计
4.2.3 肝细胞内抗氧化相关指标的检测
4.3 数据处理
4.4 结果与分析
4.4.1 亚硝酸盐对离体肝细胞的超氧化物歧化酶的影响
4.4.2 亚硝酸盐对离体肝细胞的过氧化氢酶的影响
4.4.3 亚硝酸盐对离体肝细胞的乳酸脱氢酶的影响
4.4.4 亚硝酸盐对离体肝细胞的谷胱甘肽转移酶的影响
4.4.5 亚硝酸盐对离体肝细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的影响
4.4.6 亚硝酸盐对离体肝细胞的谷胱甘肽的影响
4.4.7 亚硝酸盐对离体肝细胞的总抗氧化能力的影响
4.5 讨论
参考文献
致谢
本文编号：3946586
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
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摘要
Abstract
缩略语表
第一章 文献综述
1.1 温度和亚硝酸盐对水生动物的抗氧化系统和组织器官的影响
1.2 氧化应激的产生与活性氧对水生动物的影响
1.3 氧化应激与水生动物的非特异性免疫反应
1.4 氧化应激对水生动物基因表达水平的作用机制及其影响
1.5 研究目的与意义
第二章 温度对草鱼肾细胞的氧化应激水平的影响
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 草鱼肾细胞的培养
2.2.2 草鱼肾细胞的处理
2.2.3 活性氧的检测
2.2.4 线粒体跨膜电位的检测
2.2.5 抗氧化相关指标的检测
2.2.6 蛋白质及脂质氧化损伤的检测
2.2.7 抗氧化物酶基因表达的定量PCR检测方法
2.3 数据处理
2.4 结果与分析
2.4.1 温度对CIK细胞内活性氧的影响
2.4.2 氧化损伤指标
2.4.3 抗氧化物酶活性
2.4.4 氧化还原状态
2.4.5 抗氧化酶基因的转录水平
2.5 讨论
第三章 亚硝酸盐对草鱼血细胞的氧化应激水平的影响
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 离体血细胞的培养
3.2.2 实验设计
3.2.3 血细胞内活性氧的检测
3.2.4 血细胞线粒体跨膜电位的检测
3.2.5 血细胞内抗氧化防御相关指标的检测
3.2.6 血细胞内脂质损伤水平及血红蛋白和高铁血红蛋白的检测
3.2.7 血细胞内抗氧化物酶基因表达的定量PCR检测方法
3.3 数据处理
3.4 结果与分析
3.4.1 亚硝酸盐对血细胞的活性氧的影响
3.4.2 亚硝酸盐对血细胞的氧化损伤状态指标的影响
3.4.3 亚硝酸盐对血细胞内血红蛋白和高铁血红蛋白含量的影响
3.4.4 亚硝酸盐对血细胞内抗氧化相关酶活的影响
3.4.5 亚硝酸盐对血细胞内氧化还原状态指标的影响
3.4.6 亚硝酸盐对血细胞内抗氧化物酶基因表达的影响
3.5 讨论
第四章 亚硝酸盐暴露对草鱼离体肝细胞氧化应激水平的影响
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 离体肝细胞的获取
4.2.2 实验设计
4.2.3 肝细胞内抗氧化相关指标的检测
4.3 数据处理
4.4 结果与分析
4.4.1 亚硝酸盐对离体肝细胞的超氧化物歧化酶的影响
4.4.2 亚硝酸盐对离体肝细胞的过氧化氢酶的影响
4.4.3 亚硝酸盐对离体肝细胞的乳酸脱氢酶的影响
4.4.4 亚硝酸盐对离体肝细胞的谷胱甘肽转移酶的影响
4.4.5 亚硝酸盐对离体肝细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的影响
4.4.6 亚硝酸盐对离体肝细胞的谷胱甘肽的影响
4.4.7 亚硝酸盐对离体肝细胞的总抗氧化能力的影响
4.5 讨论
参考文献
致谢
本文编号：3946586
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/3946586.html