苹果不同PGIP启动子差异元件的功能研究

发布时间：2024-02-02 23:49

　　实时荧光定量PCR结果分析表明:PGIP1和PGIP2基因在苹果叶片中的表达量受苹果褐斑病菌、水杨酸和茉莉酸甲酯的诱导。为了研究苹果PGIP启动子响应苹果褐斑病菌、水杨酸和茉莉酸甲酯诱导的区域以及响应的元件,将‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’苹果PGIP1和PGIP2基因全长启动子及5’缺失片段与GUS基因融合,转化拟南芥,通过检测GUS基因在转基因拟南芥叶片中的表达水平,分析在拟南芥白粉病、水杨酸和茉莉酸甲酯诱导处理下,苹果PGIP1和PGIP2基因启动子的活性变化,筛选出不同诱导的响应元件,研究苹果PGIP基因启动子元件的功能,探讨苹果PGIP基因抗病表达的机制。主要结果如下:1.启动子元件分析发现‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’苹果PGIP1启动子含有茉莉酸甲酯响应元件CGTCA-motif/TGACG-motif(-763^-759bp),PGIP2启动子含有3个水杨酸响应元件TCA-element(‘秦冠’:-1594^-1585bp、-1329^-1320bp、-321^-312bp;‘太平洋玫瑰’:-1594...

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 植物启动子研究进展
        1.1.1 启动子的结构
        1.1.2 启动子的分类
        1.1.3 启动子功能研究的主要方法
    1.2 植物PGIP研究进展
        1.2.1 PGIP的结构与功能研究进展
        1.2.2 PGIP基因的研究进展
        1.2.3 PGIP基因启动子的研究进展
    1.3 本研究的目的和意义
第二章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌种及载体
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 引物
    2.2 方法
        2.2.1 PGIP基因在苹果中的qRT-PCR
        2.2.2 启动子元件分析
        2.2.3 PGIP启动子::GUS融合载体的构建
        2.2.4 拟南芥的培养
        2.2.5 蘸花侵染法转化拟南芥
        2.2.6 转基因拟南芥的筛选鉴定与纯化
        2.2.7 转基因拟南芥的诱导处理
        2.2.8 GUS化学染色及荧光活性分析
第三章 结果与分析
    3.1 不同抗病性苹果中PGIP基因的表达特性
        3.1.1. 苹果PGIP基因的组织器官特异性表达分析
        3.1.2. 苹果叶片PGIP基因表达对接种褐斑病的响应
        3.1.3. 苹果叶片PGIP基因表达对SA和MeJA诱导的响应
    3.2 不同抗病性苹果PGIP基因启动子元件分析
    3.3 植物表达载体的构建
    3.4 苹果PGIP基因启动子::GUS转化拟南芥获得纯合单拷贝转化植株
    3.5 PGIP启动子活性及元件功能分析
        3.5.1. 拟南芥白粉病菌诱导苹果PGIP基因启动子启动活性变化分析
        3.5.2. SA和MeJA诱导苹果PGIP启动子启动活性的变化
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
缩略词
致谢
作者简介



本文编号：3893349