冠突散囊菌中阿魏酸酯酶基因的发现、表达及酶学性质研究
发布时间：2022-01-04 02:53
冠突散囊菌（Aspergillus cristatus）是散囊菌目发菌科散囊菌属的一种真菌,是茯砖茶发酵过程中的优势菌种,也是形成茯砖茶独特品质的关键原因。研究表明,冠突散囊菌具有降脂减肥、抗氧化、调节免疫、抗肿瘤、抑菌等多种功效。由于微生物次级代谢产物复杂,且代谢产物的生成受生长环境等诸多因素的影响,冠突散囊菌代谢产物中发挥作用的有效成分目前并不完全清楚。为了更好地研究冠突散囊菌的功效成分,本课题组对冠突散囊菌进行了全基因组测序,系统进行了冠突散囊菌基因组功能的研究。阿魏酸（Ferulic acid）是一种普遍存在的酚酸类物质,具有清除自由基、预防血栓形成、降血脂、抗菌消炎及预防癌症的功效。在植物细胞壁中,阿魏酸与木聚糖、阿拉伯糖等半纤维素成分结合形成阿魏酸糖酯,无法发挥生物学活性。阿魏酸酯酶（Feruloyl esterase）是一种羧酸酯酶,可以水解植物细胞壁中阿魏酸酯键,释放出游离的阿魏酸。在对冠突散囊菌基因组分析过程中,我们发现基因组中存在一段基因序列,与已经报道的来源于黑曲霉的阿魏酸酯酶有73%的相似性,且含有A型阿魏酸酯酶共有的GHSLG氨基酸序列,推测这很可能是一种新的...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１基因组测序流程??Ｆｉｇ．２－１?Ｇｅｎｏｍｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ?ｐｒｏｃｅｓｓ??
２．３实验结果??２．３．１冠突散囊菌基因组的提取??采用琼脂糖凝胶电泳检测基因组ＤＮＡ的纯度，凝胶电泳结果见图２－２，?ＤＮＡ??电泳条带单一，纯度符合测序要求。??Ｍ?１?２?３??＝??７５００??５°°°??Ｊ??图２－２冠突散囊菌ＹＫＹ８０７基因组ＤＮＡ的凝胶电泳图??Ｆｉｇ．２－２?Ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ?ｏｉＡ．Ｃｒｉｓｔａｔｕｓ?ＹＫＹ８０７??（见实验记录０００５５８４－ｐｌｌ）??泳道Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；泳道１－３：基因组ＤＮＡ??Ｌａｎｅ?Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?Ｌａｎｅ?１－３：?Ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ??２．３．２冠突散囊菌基因组测序??将冠突散囊菌的基因组测序数据利用软件进行拼接，得到的结果如表２－１所??示。基因组拼装的完整性和连续性评估结果见表２－２，?ＣＥＧＭＡ的检测结果显示??基因组拼接结果具有较好的连续性和完整性。采用ＥＶｉｄｅｎｃｅＭｏｄｅｌｅｒ?（ｖｅｒｓｉｏｎ??ｒ２０１２．０６．２５）软件整合预测结果，基因预测结果见表２－３。??２１??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]冠突散囊菌对茯砖茶品质形成的影响[J]. 王亚丽,秦俊哲,黄亚亚,刘凯利. 食品与发酵工业. 2018(04)
[2]冠突散囊菌的研究与应用进展[J]. 黄彦,石瑞,苏二正. 生物加工过程. 2017(01)
[3]阿魏酸酯酶的研究与应用进展[J]. 王丽,孙钦栋,王贺祥. 山东农业大学学报(自然科学版). 2016(04)
[4]冠突散囊菌产阿魏酸酯酶及其发酵麸皮和黑毛茶形成阿魏酸的研究[J]. 刘闫,胡茂丰,刘素纯. 农产品加工. 2015(08)
[5]HPLC测定不同厂家发酵型茶叶中阿魏酸含量[J]. 陈锦,胡茂丰,文欣,吴章华,刘素纯. 中国酿造. 2015(04)
[6]冠突散囊菌液体发酵产降脂类物质的初步研究[J]. 吕嘉枥,郑欣欣,马亚宁. 陕西科技大学学报(自然科学版). 2014(06)
[7]黑茶发酵优势菌对茶多酚的生物转化研究[J]. 黄秋桂,张灵枝,谭新东. 广东农业科学. 2014(19)
[8]阿魏酸酯酶A的基因克隆与表达及其水解产物的纯化[J]. 曾妍,龚燕燕,邬敏辰,殷欣,唐存多. 生物工程学报. 2014(03)
[9]冠突散囊菌对茶叶品质成分及其抗氧化活性影响[J]. 欧阳梅,熊昌云,屠幼英,程龙,舒华,汤雯. 菌物学报. 2011(02)
[10]阿魏酸抗肿瘤作用机制研究进展[J]. 殷华芳,钱晓萍,刘宝瑞. 现代中西医结合杂志. 2010(32)
硕士论文
[1]斜卧青霉114-2中阿魏酸酯酶基因的表达与鉴定研究[D]. 申苗.山东大学 2012
本文编号：3567512
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１基因组测序流程??Ｆｉｇ．２－１?Ｇｅｎｏｍｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ?ｐｒｏｃｅｓｓ??
２．３实验结果??２．３．１冠突散囊菌基因组的提取??采用琼脂糖凝胶电泳检测基因组ＤＮＡ的纯度，凝胶电泳结果见图２－２，?ＤＮＡ??电泳条带单一，纯度符合测序要求。??Ｍ?１?２?３??＝??７５００??５°°°??Ｊ??图２－２冠突散囊菌ＹＫＹ８０７基因组ＤＮＡ的凝胶电泳图??Ｆｉｇ．２－２?Ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ?ｏｉＡ．Ｃｒｉｓｔａｔｕｓ?ＹＫＹ８０７??（见实验记录０００５５８４－ｐｌｌ）??泳道Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；泳道１－３：基因组ＤＮＡ??Ｌａｎｅ?Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?Ｌａｎｅ?１－３：?Ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ??２．３．２冠突散囊菌基因组测序??将冠突散囊菌的基因组测序数据利用软件进行拼接，得到的结果如表２－１所??示。基因组拼装的完整性和连续性评估结果见表２－２，?ＣＥＧＭＡ的检测结果显示??基因组拼接结果具有较好的连续性和完整性。采用ＥＶｉｄｅｎｃｅＭｏｄｅｌｅｒ?（ｖｅｒｓｉｏｎ??ｒ２０１２．０６．２５）软件整合预测结果，基因预测结果见表２－３。??２１??
?７０??Ｐｏｓｉｔｉｏｎ??图２－４信号肽序列预测??Ｆｉｇ．２－４?Ｓｉｇｎａｌ?ｐｅｐｔｉｄｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?（见实验记录?０００５５８４－ｐ３７）??添加了阿魏酸乙酯的琼脂平板上，含有发酵液上清的圆孔周围产生了透明??圈，见图２－５，表明冠突散囊菌发酵液具有阿魏酸酯酶活性。??图２－５冠突散囊菌发酵液阿魏酸酯酶活性平板检测结果??Ｆｉｇ．２－５?Ｐｌａｔｅ?ａｓｓａｙ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｆｅｒｕｌｏｙｌ?ｅｓｔｅｒａｓｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｂｒｏｔｈ?ｏｆ??Ａｃｒ／５加／奶（见实验记录０００５５８４－ｐ３８）??１－４：冠突散囊菌发酵液上清；０：培养基??１－４：?Ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｆｅｍｉｅｎｔａｔｉｏｎ?ｂｒｏｔｈ?ｏｆ?Ａ?Ｃｒｉｓｔａｔｕｓ＼?０：?Ｃｕｌｔｕｒｅ?ｍｅｄｉｕｍ??２５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]冠突散囊菌对茯砖茶品质形成的影响[J]. 王亚丽,秦俊哲,黄亚亚,刘凯利. 食品与发酵工业. 2018(04)
[2]冠突散囊菌的研究与应用进展[J]. 黄彦,石瑞,苏二正. 生物加工过程. 2017(01)
[3]阿魏酸酯酶的研究与应用进展[J]. 王丽,孙钦栋,王贺祥. 山东农业大学学报(自然科学版). 2016(04)
[4]冠突散囊菌产阿魏酸酯酶及其发酵麸皮和黑毛茶形成阿魏酸的研究[J]. 刘闫,胡茂丰,刘素纯. 农产品加工. 2015(08)
[5]HPLC测定不同厂家发酵型茶叶中阿魏酸含量[J]. 陈锦,胡茂丰,文欣,吴章华,刘素纯. 中国酿造. 2015(04)
[6]冠突散囊菌液体发酵产降脂类物质的初步研究[J]. 吕嘉枥,郑欣欣,马亚宁. 陕西科技大学学报(自然科学版). 2014(06)
[7]黑茶发酵优势菌对茶多酚的生物转化研究[J]. 黄秋桂,张灵枝,谭新东. 广东农业科学. 2014(19)
[8]阿魏酸酯酶A的基因克隆与表达及其水解产物的纯化[J]. 曾妍,龚燕燕,邬敏辰,殷欣,唐存多. 生物工程学报. 2014(03)
[9]冠突散囊菌对茶叶品质成分及其抗氧化活性影响[J]. 欧阳梅,熊昌云,屠幼英,程龙,舒华,汤雯. 菌物学报. 2011(02)
[10]阿魏酸抗肿瘤作用机制研究进展[J]. 殷华芳,钱晓萍,刘宝瑞. 现代中西医结合杂志. 2010(32)
硕士论文
[1]斜卧青霉114-2中阿魏酸酯酶基因的表达与鉴定研究[D]. 申苗.山东大学 2012
本文编号：3567512
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