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Omi/HtrA2敲除鼠不同组织老化相关基因表达差异的比较

发布时间:2022-02-09 06:35
  细胞衰老是由多种应激反应综合导致的一个过程,这些应激反应将细胞引入到一种不可逆的生长停滞的状态。线粒体内稳态的平衡,是机体维持细胞正常运转,应对各种损伤刺激和缓解细胞死亡必不可少的重要保障。当线粒体抗氧化防御系统、分裂融合、生物合成等发生异常时,会造成严重的线粒体功能障碍,导致细胞不可逆的生长停滞,导致神经退行性病、癌症、心血管类疾病、糖尿病等衰老相关性疾病。Omi/HtrA2是一种丝氨酸蛋白酶,属于HtrA家族,正常情况下位于线粒体膜间隙中,在维持线粒体内稳态中起到重要作用。Omi/HtrA2是具有N末端线粒体靶向序列的核编码蛋白。Omi/HtrA2含有一个或两个C末端PDZ结构域,可激活其丝氨酸蛋白酶活性。Omi/HtrA2敲除鼠又名HtrA2mnd2小鼠(-/-),其中Omi/HtrA2的S276C发生错义突变,导致Omi/HtrA2蛋白酶活性的丧失。小鼠表现出肌肉萎缩,神经变性。为了验证各组织的线粒体功能、氧化应激等的变化差异,本实验利用实时定量PCR检测了HtrA2mnd2小鼠(-/-)的脑、心脏、肝脏、肾脏4个组织线粒体功能相关基... 

【文章来源】:吉林大学吉林省211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】:59 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

Omi/HtrA2敲除鼠不同组织老化相关基因表达差异的比较


P62基因表达序列模式图

琼脂糖凝胶电泳,小鼠,基因杂合子


第三章 结 果3.1 HtrA2mnd2小鼠形态学变化HtrA2mnd2小鼠(-/-)由 Omi/HtrA2 基因杂合子小鼠(+/-)交配繁殖而得,新生幼崽在 3 周左右进行基因型鉴定。根据酶切片段长度及数量,鉴定小鼠为野生型小鼠(+/+)(Wildtype)、Omi/HtrA2 基因杂合子小鼠(+/-)(Heterozygote)和 HtrA2mnd2小鼠(-/-)(Homozygote)。(图 3.1)取 45 天龄的野生型小鼠(+/+)一同处死,留取脑、心脏、肝脏和肾脏组织,用于后续实验。根据鉴定结果分离出 HtrA2mnd2小鼠(-/-)和野生型小鼠(+/+)分笼饲养。25天左右,HtrA2mnd2小鼠(-/-)逐渐表现出肌肉萎缩、弯腰驼背、共济失调和静止性震颤,步态不稳等形态特征。HtrA2mnd2小鼠(-/-)生存期约为 45 天(图 3.2)。

小鼠,体型,基因杂合子,基因型鉴定


左右进行基因型鉴定。根据酶切片段长度及数量)(Wildtype)、Omi/HtrA2 基因杂合子小鼠(+/-)鼠(-/-)(Homozygote)。(图 3.1)取 45 天龄的野脑、心脏、肝脏和肾脏组织,用于后续实验。果分离出 HtrA2mnd2小鼠(-/-)和野生型小鼠(+/nd2小鼠(-/-)逐渐表现出肌肉萎缩、弯腰驼背、共等形态特征。HtrA2mnd2小鼠(-/-)生存期约为 45图 3.1 琼脂糖凝胶电泳显像结果为野生型小鼠,(+/-)为杂合子小鼠,(-/-)HtrA


本文编号:3616532

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