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高选择性半胱氨酸荧光探针的合成及其在活细胞中的应用

发布时间:2022-02-20 13:44
  目的同型半胱氨酸(Hcy)、半胱氨酸(Cys)和谷胱甘肽(GSH)在生理过程中起着关键作用。由于Cys、Hcy和GSH的结构和化学性质的相似性,对它们的识别一直是一个巨大的挑战。旨在合成一种荧光分子用于单一识别Cys。方法基于Cys与丙烯酸酯的共轭加成环化反应,合成用于检测Cys的近红外荧光探针CN-NIR。在磷酸盐缓冲液(PBS pH=7.4,含20%DMF)体系中,以紫外吸收光谱和荧光光谱为研究手段,测试探针CN-NIR对Cys的选择性识别。结果实验结果表明,探针CN-NIR能够高选择性识别Cys,而其他19种氨基酸和6种干扰性金属离子的存在几乎不会干扰其识别过程。当加入Cys后,探针溶液颜色由粉色变为紫色,探针荧光强度显著增强,并且荧光强度与Cys浓度(0~140μM)呈现良好线性关系(R2=0.991),对Cys的检测限为1.03μM,该值低于细胞中Cys的正常含量(30~200μM)。同时,探针可以在生理pH条件下有效识别Cys。推测探针对Cys的识别过程可能是共轭环加成机制。此外,细胞实验表明,探针在HeLa细胞中具有较低的细胞毒性,并且能够有效地识别... 

【文章来源】:河北北方学院学报(自然科学版). 2020,36(01)

【文章页数】:9 页

【文章目录】:
1 实验部分
    1.1 试剂与仪器
    1.2 探针的合成(图2)
        1.2.1 化合物1的合成[29]
        1.2.2 化合物2的合成[29]
        1.2.3 化合物3的合成[30]
        1.2.4 化合物CN-OH的合成[29]
        1.2.5 探针CN-NIR的合成[31]
    1.3 细胞毒活性及细胞成像
        1.3.1 MTT法[32]
        1.3.1 细胞成像
2 结果与讨论
    2.1 光谱性质
    2.2 探针CN-NIR对Cys的选择性识别
    2.3 pH值对探针CN-NIR和Cys反应的影响
    2.4 细胞成像
3 结论与讨论



本文编号:3635168

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