磁性纳米粒子对脂肪酶CRL的固定化

发布时间：2024-03-30 12:43

　　脂肪酶(EC3.11)作为绿色生物催化剂,广泛应用于生物制药、食品加工、化学分析等领域。固定化为提升酶重用性及稳定性提供了一种有效的解决途径,而以磁性纳米粒子为固定化载体可以更为方便快捷地回收酶。本文围绕磁性纳米粒子,制备出三种复合载体,包括化学共沉淀法制备得到磁性氧化石墨纳米复合物(MGO)、表面活性剂改性磁性氧化石墨烯(SMGO)和表面活性剂改性Fe304磁性纳米粒子(Span/Tween Fe304),探讨三种载体用于褶皱假丝酵母脂肪酶(CRL)的固定化效果,并重点研究表面活性剂改性载体对脂肪酶催化特性的影响。采用正交实验对MGO载体的制备进行优化,以酶活与比活为考察指标,得到MGO的最佳制备工艺。傅里叶红外光谱(FT-IR)与扫描电镜(SEM)表征分析表明MGO制备成功,GO表层的羧基官能团在强碱条件下被部分还原,导致MGO表面羧基含量明显减少。在最优固定化条件下,固定化酶活力回收率及蛋白回收率分别为92.41%、88.2%。固定化酶重复利用第二次相对酶活下降至40%左右,推测MGO载体上固定的脂肪酶大部分为物理吸附,极少部分为共价固定。采用化学共沉淀法制备MGO,直接在反应体...

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１洋葱伯克霍尔德氏菌脂肪酶（ＢＣＬ）结构色带示意图［１６］?（ｐ带用箭头和螺旋线圈表示，盖子??（１１８－１５９）为红色螺旋，面向盖子的子域（２１４－２６１）为蓝色，Ｃａ２＿由球形表示，催化三联体（Ｓ８７，??Ｄ２６４和Ｈ２８６）和氨基酸残基用球棍表示??

研宄人员通过对多种脂肪酶全尺寸３Ｄ结构的研究，发现不同来源的脂肪??酶虽然会在尺寸大小及氨基酸序列上存在差异，但它们均拥有类似的结构基序，即ａ／ｐ??水解酶折叠。其核心由五个及以上类似的Ｐ带构成，侧翼为ａ螺旋。其结构如图１－１所示。??脂肪酶的活性中心包含三个氨基酸残基，分别为丝....

图１－２酶的固定化方法??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｍｅｔｈｏｄｓ?ｆｏｒ?ｅｎｚｙｍｅ?ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ＾９］??

??固定化方式是影响固定化酶催化特性的主要因素之一１１７１。固定化方式有多种，按照??人类来分有化‘７：法和物理法（图１－２所示）。吸附法和包埋法均属于物理法．前者是指??将＿勾各类载体材料或者吸附剂在温和条件下直接接触，酶通过氢键、范德华力、静电??相互作用或疏水相互作用吸附在....

图１－４氧化石墨烯结构??－

氧化石墨烯（ＧＯ）为新型二维（２Ｄ）纳米材料，具有优异的物理化学性能，在氧??化石墨烯结构中，其边缘和褶皱处多为羧基，片层表面上的官能团主要为羟基和环氧基。??其结构如图１－４所示。氧化石墨烯被广泛应用于纳米载体的研究，可应用于多种生物活??性物质，进而开发新型生物催化剂、生物传....

图２－３磁性氧化石墨烯固定化酶分散液（ａ）；固定化酶液在外部磁场作用２ｍｉｎ（ｂ）??Ｆｉｇ．?２－３?Ｔｈｅ?ｄｉｓｐｅｒｓｉｎｇ?ｌｉｑｕｉｄ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｍａｇｎｅｔｉｃ?ｇｒａｐＨｅｎｅ?ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ?ｅｎｚｙｍｅ?（ａ）；??

硕士学位论文磁纳米子对脂？肪酶ＣＲＬ的固定化??图２－２〇〇（０．５尺）、？６３〇４（２１〇、１＾〇〇（２｛（：，８幻８￡１＾图??Ｆｉｇ?２－２?ＧＯ、Ｆｅ３〇４、ＭＧＯ?Ｓｃａｎｎｉｎｇ?ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ。??屬屬：：：丨??＿：：：．１：．＿｜難??图....

本文编号：3942372