生物合成二氧槲皮素的工程菌的构建

发布时间：2024-03-31 02:57

　　二氢槲皮素(Dihydroquercetin,DHQ)作为一种重要的黄酮类物质,是一种比较稀缺的天然强效抗氧化剂,可有效去除人体内的自由基与毒素,具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒和调节免疫力等重要生物活性,是食品、医药和保健品领域的珍贵原料,而植物提取和化学合成的产率较低且不环保。目前,已能利用大肠杆菌和工程酵母等微生物合成二氢黄酮、黄酮、异黄酮、黄酮醇、花色素和黄烷酮等黄酮类化合物,为DHQ的生物合成提供了理论支持。本研究应用合成生物学的方法,在原核和真核表达系统中将DHQ合成途径中的植物源关键基因(F3H、F3’H)进行异源表达,并进行条件优化,最终微生物合成天然产物DHQ。通过基因筛选和优化后,人工合成具有大肠杆菌密码子偏好性的3种不同植物来源的黄酮3-羟化酶基因(CsF3H、GbF3H、GmF3H)和类黄酮3’-羟化酶基因(CsF3’H、GbF3’H、GmF3’H)以及2种细胞色素P450还原酶基因(ATR、CPR),并分别构建单基因表达载体和多基因共表达载体pETM6-F3H-F3’H-ATR/CPR。将重组表达载体转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,构建大肠杆菌工程菌...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1二氢槲皮素分子式Fig.1-1Molecularformulaofdihydroquercetin

?匦裕∟AKAYAMAetal.,1993;MAROZIENetal.,2000;YUNetal.,2000;HARAGUCHIetal.,2014）、调节酶活（SUetal.,2019;SUetal.,2020）等多种生物活性。因此它在食品、药品、化妆品以及工业领域均有广泛的应....

图1-2二氢槲皮素的生物合成途径Fig.1-2Biosynthesisofdihydroquercetin

中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论7的催化下生成柚皮素。类黄酮途径中，柚皮素在黄烷酮3-羟化酶（Flavanone3-hydroxylase，F3H）的催化下生成二氢黄酮醇类物质。二氢槲皮素可由二氢黄酮醇经类黄烷酮3’-羟化酶（Flavanone3’-hydroxylase，F....

图2-2CsF3H、GbF3H、GmF3H的SignalP5.0信号肽预测结果

中国农业科学院硕士学位论文第二章F3H和F3’H的生物信息学分析132.3.1.3F3H蛋白质信号肽和跨膜结构域预测利用SignalP5.0Server服务器进行信号肽预测（图2-2），结果表明这3种F3H蛋白均不含有信号肽，属于非分泌蛋白。（a）CsF3H（b）GbF3H（c）....

图2-3CsF3H、GbF3H、GmF3H的TMHMM预测结果

中国农业科学院硕士学位论文第二章F3H和F3’H的生物信息学分析132.3.1.3F3H蛋白质信号肽和跨膜结构域预测利用SignalP5.0Server服务器进行信号肽预测（图2-2），结果表明这3种F3H蛋白均不含有信号肽，属于非分泌蛋白。（a）CsF3H（b）GbF3H（c）....

本文编号：3943342