抗沙门菌O:9抗原单克隆抗体的制备及初步应用

发布时间：2024-06-29 00:58

　　沙门菌是一种重要的人兽共患病原菌,在全世界范围内普遍存在,易感染各种家畜家禽,对养殖业的生产和人类的食品卫生安全造成威胁。现代规模化家禽养殖业中,沙门菌的感染主要以O:9血清型的鸡白痢沙门菌和肠炎沙门菌为主。这些沙门菌能引起雏鸡极高的发病率和死亡率,被感染的成年鸡表现为无症状带菌,通过垂直传播感染鸡蛋,从而降低下一代雏鸡的成活率,且成年鸡的产蛋能力也会因感染显著下降。这些都对养禽业造成巨大的经济损失。感染沙门菌的家禽作为主要传染源之一,是沙门菌防控与净化的关键控制点。因此,快速、精确、有效的沙门菌检测方法,有利于尽早发现家禽沙门菌的感染,从而切断传染源,保证食品的卫生安全和人类的健康。沙门菌血清型划分的主要依据是其细菌表面O-抗原的差异。O-抗原作为革兰阴性菌表面的O-特异侧链,由不同的重复寡糖单元构成,位于细胞壁结构中的脂多糖(LPS)上,能够诱导动物机体产生特异性的抗体,可作为沙门菌感染的诊断靶标。目前,被广泛使用的禽沙门菌抗体诊断方法以基于O-抗原与抗体结合的玻板凝集试验(PAT)为主。但在临床应用中,PAT检测依靠肉眼观察,所用的染色抗原存在批次差异,导致PAT的检测结果不够稳...

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【部分图文】：

图２细菌ＬＰＳ的化学结构（Ｅｒｒｉｄｇｅｅｔａｌ．，２００２）??Ｆｉｇｕｒｅ?２?Ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ＬＰＳ??沙门菌众多的血清型根据〇－抗原的不同，可分成多个不同的血清群

ｉｂｉａｎ，２００３）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ＬＰＳ??Ｐ?ＰＰ?ＰＰ?Ｐ?Ｐ?Ｌ?Ｐ?Ｔ＾Ｘ：：ｒ：：：：ｒ：：：＾??ｌ???Ｒ???Ｉ??Ｔ?！??Ｏｕｔｅｒ?ｃｏｒｅ?Ｉｎｎｅｒ?ｃｏｒｅ??＇?！＞?＾?｜?＾??０－ａｎ....

图３夹心ＥＬＩＳＡ方法的大致流程（Ｊｉｎ?ｅｔａｌ．，２０１３）??Ｆｉｇｕｒｅ?３?Ｇｅｎｅｒａｌ?ｆｌｏｗ?ｏｆ?ｓａｎｄｗｉｃｈ?ＥＬＩＳＡ??

是特定激发光下荧光信号强度的变化，且结合计算机软件可将实验结果进行数字化，??有利于数据的分析（Ｇｏｎｚｄｌｅｚ－Ｍａｒｔｉ＇ｎｅｚｅｔａｌ．，?２０１８）。ＥＬＩＳＡ技术自上世纪发明以来，??己经成为许多免疫学实验、临床诊断和生物医学中最为常见的免疫学检测方法之一。??如今，使....

图４ＬＦＩＡ装置的组装示意图（Ｇａｏｅｔａｌ．，?２０１８）??Ｆｉｇｕｒｅ?４?Ａｓｓｅｍｂｌｙ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ＬＦＬＡ??ＬＦＩＡ的性能可能受诸多因素的影响，例如材料，样品粘度，抗体亲和力，信号产??生系统等

体金颗粒会??显示出肉眼可见的红色（Ｓｏｎｇ?ｅｔａｌ．，２０１９）。其他材料也可以直接观察到实验结果，或??间接地在相应的信号检测器的帮助下获得检测结果。最后，多余的液体样品在通过捕??获线之后，会被末端的吸收垫吸收。??剛?ｓａ＿?Ｃａｐ＾ｐａｄ?ｃ〇ｎｔｒ〇１?ｓｔｒｉｐｅ....

图５流式细胞术示意图（Ｇａｏ?ｅｔａｌ．，２０１８）??Ｆｉｇｕｒｅ?５?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｆｌｏｗ?ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ??单克隆抗体则用于将荧光染料结合到待检测颗粒的目标靶抗原上

?Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ）被广泛应用于免疫学的各种研究，尤其是液体样品??中细胞等颗粒物的分析。其依赖于多个系统的整合，包括光学，力学，流体学和计算??机科学等。流式细胞术可以同时分析一个颗粒样品的多个参数，其基本原理是控制粒??子一个接一个地依次通过激光束发射装置和信号检测传感器，....

本文编号：3996919