二倍体卵子单性生殖发育优势的机制研究

发布时间：2023-03-12 22:15

　　雌核发育因其获得后代遗传物质单一(由母本控制),是一种重要的鱼类育种方式。普通二倍体鱼产生单倍体卵子,直接进行雌核发育,不可存活,需通过物理、化学方法使染色体加倍。本实验室通过远缘杂交获得的异源四倍体鲫鲤产生的二倍体卵子,可直接进行雌核发育,获得二倍体子代,该子代可产生不减数的二倍体配子,再进行雌核发育时,孵化率更高。以上发育现象表明,二倍体卵子(尤其是雌核发育来源)在单性生殖时具有明显的发育优势。但是关于该发育优势的分子机制,尚无相关研究。鱼类受精卵经10次分裂后,即1K细胞期,发生囊胚中期转换,由母源性调控转为合子型调控。现有研究表明,卵子所储备的母源性物质,不仅满足胚胎发育早期分裂的需要,同时也可以改变染色体的修饰状态,调控合子基因的激活表达。因此,我们对单倍体卵子和两种来源的二倍体卵子进行了转录组分析来比较其物质储备的差异。同时,我们选取1K细胞期为时间节点,对自交产生的二倍体胚胎、雌核发育的单倍体胚胎和二倍体胚胎进行组蛋白后修饰的分析和转录组分析来初步揭示二倍体卵子发育优势的分子机制。通过研究获得如下主要结果:(1)二倍体/单倍体卵子的转录组对比分析显示,在二倍体卵子中1,2...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 实验鱼的来源
        1.1.2 早期胚胎发育及合子基因激活
        1.1.3 鱼类雌核发育
        1.1.4 单倍体综合症及其机制的研究现状
        1.1.5 转录组技术在鱼类研究中的运用
    1.2 研究的目的与意义
第二章 二倍体卵子与单倍体卵子的发育潜能机制比较
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 卵子及胚胎RNA的提取
        2.3.2 转录组测序文库构建
        2.3.3 生物信息学分析流程
        2.3.4 q RT-PCR
        2.3.5 卵子及胚胎组蛋白的提取
        2.3.6 免疫印迹杂交
    2.4 实验结果
        2.4.1 二倍体卵子、单倍体卵子和1K细胞期胚胎的转录组分析
        2.4.2 二倍体和单倍体胚胎差异表达基因的q RT-PCR验证
        2.4.3 二倍体和单倍体胚胎1K细胞期组蛋白后修饰水平比较
    2.5 讨论
第三章 两种生殖方式影响二倍体卵子发育的比较
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 主要试剂
        3.2.3 主要仪器
    3.3 实验方法
    3.4 实验结果
        3.4.1 两种来源二倍体卵子和雌核发育胚胎1K细胞期转录组分析
        3.4.2 两种来源二倍体卵子差异表达基因的q RT-PCR验证
        3.4.3 两种雌核发育二倍体胚胎1K细胞期组蛋白后修饰水平比较
    3.5 讨论
第四章 结论与展望
    4.1 结论
    4.2 展望
参考文献
附录
致谢



本文编号：3762040