水稻长护颖突变体和条纹叶突变体的基因鉴定与qRT-PCR表达分析
发布时间：2023-03-21 19:47
第一部分水稻长护颖突变体的基因克隆与表达分析利用EMS对水稻(Oryza sativaL.)保持系品种宜香1B进行诱变,筛选出三份长护颖突变体Oslg-1, Oslg-2和Oslg-3,通过表型分析、等位性鉴定、基因定位和生物信息学分析,以及qRT-PCR表达分析,获得如下结果：1. Oslg-1突变体小穗在幼穗发育早期与野生型无明显差异,但在成熟期其护颖的远轴表皮细胞凸起且粗糙,形成的结节轴向对齐排列,且毛状物较多,形成垂直相间的横纵沟,表皮细胞结构与外稃的极其相似。2.利用F2分离群体对突变体Oslg-1进行基因定位,遗传分析表明,Oslg-1受一对隐性单基因控制,将OsLG基因定位于第7染色体短臂SSR标记RM5344和RM20934之间,遗传距离分别为1.11 cM和0.82 cM,物理距离为246.3 kb。3.对该区域候选基因测序分析,发现LOCOs07g04670在编码区第182位碱基发生突变(T→A),导致其编码蛋白第61位氨基酸改变(Leu→His)。等位性分析表明,Oslg-2, Oslg-3与Oslg-1属等位变异,进而对突变体Oslg-2和...
【文章页数】：80 页
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 水稻长护颖突变体的基因克隆与表达分析
第一章 文献综述
1 引言
2 水稻花器官发育
2.1 水稻花序分化及发育
2.2 水稻小穗的发育过程
3 水稻花器官发育相关基因的研究进展
4 水稻长护颖相关基因的研究进展
5 本研究的目的和意义
第二章 材料与方法
1 实验材料
1.1 材料
1.2 试剂
1.3 仪器
2 实验方法
2.1 突变体Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3等位性鉴定
2.2 农艺性状考查及穗部表型观察
2.3 组织细胞学观察
2.4 遗传分析及群体构建
2.5 基因定位
2.6 候选基因的序列扩增及测序
2.7 基因OsLG的序列同源比对及进化分析
2.8 基因OsLG和PAP2的实时荧光定量组织表达分析
第三章 结果与分析
1 突变体花器官分析
1.1 突变体Oslg表型分析
1.2 突变体Oslg的组织细胞学分析
2 突变体Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3的等位性分析
3 突变体Oslg-1的遗传分析
4 突变体Oslg-1的基因定位
5 突变体Oslg-1的候选基因的序列分析
6 基因OsLG的序列同源比对及进化分析
7 OsLG和PAP2实时荧光定量(qRT-PCR)组织表达分析
第四章 讨论
1 水稻长护颖基因的研究概况
2 长护颖突变体之间的等位差异
3 基因OsLG和PAP2的表达差异分析预测
4 小结与展望
第二部分 水稻温敏型突变体stripe1-2和stripe1-3中的核糖核苷酸还原酶小亚基负责叶绿素的生物合成
第一章 文献综述
1 引言
2 叶绿体的研究概况
2.1 叶绿体结构及发育
2.2 影响水稻叶绿体发育的相关基因
3 叶绿素生物合成、调控与降解途径的研究进展
3.1 叶绿素的生物合成途径
3.2 叶绿素生物合成途径的调控
3.3 叶绿素的降解途径
4 质核信号的调控途径
5 叶色突变体的类型
6 叶色突变体的应用价值
7 水稻叶色突变相关基因的研究进展
8 本研究的目的和意义
第二章 材料与方法
1 实验材料
2 实验方法
2.1 突变体stl-2和stl-3等位性鉴定
2.2 农艺性状调查、遗传群体构建及遗传分析
2.3 叶绿素和类胡萝卜素含量测定
2.4 光合作用的测定
2.5 透射电子显微镜观察
2.6 基因定位
2.7 候选基因的预测及测序
2.8 蛋白结构分析
2.9 温度梯度实验
2.10 实时荧光定量定量PCR(qRT-PCR)特异性分析
第三章 结果与分析
1 突变体stl-2和stl-3的等位性分析
2 突变体stl-2和stl-3的表型特征
3 野生型和突变体的农艺性状和光合作用分析
4 野生型和突变体中光合色素的含量分析
5 透射电子显微镜观察
6 stl-2和stl-3的基因定位
7 蛋白结构预测和同源进化分析
8 叶绿素生物合成途径相关基因的表达分析
9 影响叶绿素发育的其他相关基因的表达分析
10 温控实验中叶绿体发育相关基因的表达分析
第四章 讨论
1 叶色突变体的温敏特性
2 叶色突变体叶绿体发育特征
3 核糖核苷酸还原酶大小亚基调控
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录
本文编号：3767184
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摘要
ABSTRACT
第一部分 水稻长护颖突变体的基因克隆与表达分析
第一章 文献综述
1 引言
2 水稻花器官发育
2.1 水稻花序分化及发育
2.2 水稻小穗的发育过程
3 水稻花器官发育相关基因的研究进展
4 水稻长护颖相关基因的研究进展
5 本研究的目的和意义
第二章 材料与方法
1 实验材料
1.1 材料
1.2 试剂
1.3 仪器
2 实验方法
2.1 突变体Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3等位性鉴定
2.2 农艺性状考查及穗部表型观察
2.3 组织细胞学观察
2.4 遗传分析及群体构建
2.5 基因定位
2.6 候选基因的序列扩增及测序
2.7 基因OsLG的序列同源比对及进化分析
2.8 基因OsLG和PAP2的实时荧光定量组织表达分析
第三章 结果与分析
1 突变体花器官分析
1.1 突变体Oslg表型分析
1.2 突变体Oslg的组织细胞学分析
2 突变体Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3的等位性分析
3 突变体Oslg-1的遗传分析
4 突变体Oslg-1的基因定位
5 突变体Oslg-1的候选基因的序列分析
6 基因OsLG的序列同源比对及进化分析
7 OsLG和PAP2实时荧光定量(qRT-PCR)组织表达分析
第四章 讨论
1 水稻长护颖基因的研究概况
2 长护颖突变体之间的等位差异
3 基因OsLG和PAP2的表达差异分析预测
4 小结与展望
第二部分 水稻温敏型突变体stripe1-2和stripe1-3中的核糖核苷酸还原酶小亚基负责叶绿素的生物合成
第一章 文献综述
1 引言
2 叶绿体的研究概况
2.1 叶绿体结构及发育
2.2 影响水稻叶绿体发育的相关基因
3 叶绿素生物合成、调控与降解途径的研究进展
3.1 叶绿素的生物合成途径
3.2 叶绿素生物合成途径的调控
3.3 叶绿素的降解途径
4 质核信号的调控途径
5 叶色突变体的类型
6 叶色突变体的应用价值
7 水稻叶色突变相关基因的研究进展
8 本研究的目的和意义
第二章 材料与方法
1 实验材料
2 实验方法
2.1 突变体stl-2和stl-3等位性鉴定
2.2 农艺性状调查、遗传群体构建及遗传分析
2.3 叶绿素和类胡萝卜素含量测定
2.4 光合作用的测定
2.5 透射电子显微镜观察
2.6 基因定位
2.7 候选基因的预测及测序
2.8 蛋白结构分析
2.9 温度梯度实验
2.10 实时荧光定量定量PCR(qRT-PCR)特异性分析
第三章 结果与分析
1 突变体stl-2和stl-3的等位性分析
2 突变体stl-2和stl-3的表型特征
3 野生型和突变体的农艺性状和光合作用分析
4 野生型和突变体中光合色素的含量分析
5 透射电子显微镜观察
6 stl-2和stl-3的基因定位
7 蛋白结构预测和同源进化分析
8 叶绿素生物合成途径相关基因的表达分析
9 影响叶绿素发育的其他相关基因的表达分析
10 温控实验中叶绿体发育相关基因的表达分析
第四章 讨论
1 叶色突变体的温敏特性
2 叶色突变体叶绿体发育特征
3 核糖核苷酸还原酶大小亚基调控
参考文献
致谢
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本文编号：3767184
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