FGF-2慢病毒载体介导的人羊膜间充质干细胞复合兔自体富血小板血浆促进腱—骨愈合的实验研究

发布时间：2024-01-25 17:18

　　目的:(1)探索不同浓度的FGF-2溶液对人羊膜间充质干细胞(Human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)向韧带和骨诱导的效果。(2)探究FGF-2慢病毒载体转染后的hAMSCs复合兔自体富血小板血浆(Platelet rich plasma,PRP)促进腱-骨愈合的可行性。方法:(1)通过酶消化法(2次胰酶消化,1次II型胶原酶消化)提取hAMSCs,连续传代培养,显微镜下观察hAMSCs的细胞形态,hAMSCs传至第三代(P3代hAMSCs)可用于后续实验;通过免疫荧光和流式细胞术对P3代hAMSCs进行鉴定。(2)用不同浓度(0,10,20,40 ng/ml)的FGF-2溶液对P3代hAMSCs进行诱导,CCK8法检测不同浓度的FGF-2溶液对hAMSCs增殖的影响;诱导14天后,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同浓度的FGF-2溶液诱导后的hAMSCs韧带和成骨相关基因的表达情况;Western Blot/免疫荧光检测不同浓度的FGF-2溶液诱导后的hAMSCs韧带和成骨相关蛋白的表达;天狼猩红染色检测不同浓度的FGF-2...

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

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英文摘要
前言
第一部分 人羊膜间充质干细胞的分离培养及鉴定
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
第二部分 不同浓度的FGF-2溶液诱导人羊膜间充质干细胞及FGF-2慢病毒载体转染人羊膜间充质干细胞
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
第三部分 富血小板血浆的制备及激活
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
第四部分 FGF-2慢病毒载体介导的人羊膜间充质干细胞复合兔自体富血小板血浆促进腱-骨愈合
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
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本文编号：3885232