热加工影响拟穴青蟹肌肉过敏原致敏性及其分子机理研究
发布时间：2022-02-04 17:23
甲壳类水产食物过敏的发病率逐年攀升,拟穴青蟹（Scylla paramamosain）作为重要的甲壳类水产经济动物之一,其引起的食物过敏性疾病不容忽视。热加工可有效降低单一过敏原的致敏性,但对于青蟹食物基质致敏性影响的研究有待深入。因此探究热加工影响拟穴青蟹肌肉过敏原致敏性及其分子机理,对于低致敏性产品的加工方法研究和保证拟穴青蟹的食用安全性具有重要意义。本研究首先评估3种热加工方式（煮制、蒸制、高温压力处理）对拟穴青蟹肌肉粗蛋白结构、消化酶水解稳定性和免疫结合活性的影响;针对高温压力处理的拟穴青蟹肌肉组织进行模拟胃肠液的连续消化,利用人肠道上皮细胞Caco-2转运模型对消化产物进行转运吸收,采用嗜碱性粒细胞激活试验检测转运产物的致敏性。结果显示,与生鲜青蟹肌肉粗蛋白相比,热加工后的青蟹肌肉粗蛋白的α螺旋含量显著增加,β折叠和β转角含量降低,蛋白稳定性降低;热加工后青蟹肌肉粗蛋白的酶解稳定性下降,消化率升高,酶解产物的免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）E结合活性的抑制率降低,热稳定性过敏原的IgG结合能力下降。与煮制和蒸制2种热加工方式相比,高温压力处理对青蟹肌肉粗蛋白免...
【文章来源】：集美大学福建省
【文章页数】：148 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
过敏原组分诊断方法的原理示意[24]250
AIT在用于食物过敏治疗时,普遍采用未经修饰的变应原,这也在一定程度上限制了用于治疗的剂量,同时不良副作用及较长的治疗时间等因素的影响,也制约了AIT的发展。因此,国内外学者在保持变应原免疫原性的同时减少变应原敏感性[17]55-73,[36]的前提下,进一步对AIT的作用方式进行了研究。研究主要集中在四个方面(图1-2)[17]55-73:(1)构建低变应原[37](hypoallergens),可通过添加或删除抗原表位、采用理化修饰改变蛋白结构,以消除天然过敏原的IgE反应活性或变应原性。(2)采用表位肽(epitope peptides)代替完整过敏原[38,39],T细胞表位肽不能与IgE发生交联,但可以触发CD4+T细胞并刺激具有T细胞调节功能的T细胞表位,以单个肽或肽混合物的形式递呈,以增强Th1和Treg细胞活性。猫主要过敏原Fel d 1的T细胞表位肽进行临床试验的结果表明,T细胞表位肽在猫过敏方面可诱导T细胞的转化,可能具有临床疗效,且治疗效果可能持续较长时间[40]。在对屋尘螨主要过敏原表位肽的研究中表明,这些表位肽不仅在体外实验中表现出较好的降低致敏性结果,并且在临床给药一年后仍然对机体产生持续的耐受效果[41]。同时,基于B细胞表位肽的疫苗在激活过敏原特异性T细胞和诱导过敏患者外周血单核细胞分泌促炎因子方面也具有较强的降低潜能[42]。(3)模拟表位肽(mimotopes)[43],模拟IgE结合表位的结构或序列的模拟表位肽,可以诱导机体产生能够识别过敏原的抗体,这些抗体可抑制机体食物过敏。文献表明过敏原特异性IgG4表位肽抗体可拮抗和阻断肥大细胞和嗜碱性细胞表面IgE引起的抗原反应,从而抑制效应细胞的活化和脱颗粒[44],进而起到AIT的作用。(4)构建共轭分子(conjugated molecules)[45],过敏原与具有免疫调节功能的分子偶联成共轭分子,可促进促耐药Treg细胞或Th1细胞的诱导。此外,在多种过敏动物模型中已证明,饮食及微生物可影响口服耐受性和过敏敏化进程[46],高脂饮食引起的微生物种类及数目的改变增加了机体对食物过敏的敏感性[47],而肠道中微生物分泌的组胺则影响了过敏性炎症的严重程度[48],因此可通过调节饮食、改善体内菌群组成等方式,达到预防或控制食物过敏的效果。细菌来源的高水平的短链脂肪酸的摄入可有效防止小鼠和人类过敏[49],采用食物过敏患儿的粪便菌群定植不能保护动物免受食物过敏,但健康儿童微生物菌群的定殖则可有效防止动物出现食物过敏情况[50];这表明肠道微生物可调节机体对食物抗原的过敏反应,意味着机体微生物的改变可能在一定程度上对食物过敏有显著的预防及治疗效果。
本研究的技术路线
【参考文献】：
期刊论文
[1]非热加工技术消减食物过敏原研究进展[J]. 郭颖希,王满生,成军虎,韩忠. 食品与机械. 2019(05)
[2]拟穴青蟹新型过敏原磷酸丙糖异构酶的鉴定分析[J]. 陈仲玮,费丹霞,杨阳,刘鹏源,蔡秋凤,张凌晶,曹敏杰,刘光明. 集美大学学报(自然科学版). 2016(06)
[3]储藏微环境对小麦蛋白质二级结构影响[J]. 赵妍,刘晓林,王若兰,马玉洁,杨俊. 粮食与油脂. 2014(01)
博士论文
[1]拟穴青蟹（Scylla paramamosain）肌浆蛋白过敏原的致敏性研究[D]. 杨阳.集美大学 2018
[2]酪蛋白抗氧化肽结构特征对其生物利用度的影响及其跨膜转运机制的研究[D]. 王波.中国农业大学 2016
硕士论文
[1]美拉德反应影响拟穴青蟹主要过敏原致敏性的机理研究[D]. 杨煌.集美大学 2019
[2]坛紫菜硫酸多糖和龙须菜硫酸多糖的抗腹泻活性研究[D]. 刘波.集美大学 2019
[3]拟穴青蟹肌质钙结合蛋白的过敏性研究[D]. 胡梦君.集美大学 2018
[4]牛羊乳酪蛋白抗原表位鉴定及热处理对其抗原性的影响[D]. 韩波.陕西科技大学 2018
[5]中国对虾（Penaeus chinensis）原肌球蛋白抗原表位和关键氨基酸的筛选及糖基化对其过敏原性的影响[D]. 王金宝.浙江工商大学 2018
[6]美拉德反应对鱼类小清蛋白免疫学性质及结构的影响[D]. 赵勇娟.集美大学 2016
[7]克氏原螯虾新型过敏原的鉴定与性质研究[D]. 张永霞.集美大学 2015
[8]克氏原螯虾过敏原的性质研究[D]. 陈亨莉.集美大学 2013
[9]蟹类过敏原的研究[D]. 梁银龙.集美大学 2008
本文编号：3613623
【文章来源】：集美大学福建省
【文章页数】：148 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
过敏原组分诊断方法的原理示意[24]250
AIT在用于食物过敏治疗时,普遍采用未经修饰的变应原,这也在一定程度上限制了用于治疗的剂量,同时不良副作用及较长的治疗时间等因素的影响,也制约了AIT的发展。因此,国内外学者在保持变应原免疫原性的同时减少变应原敏感性[17]55-73,[36]的前提下,进一步对AIT的作用方式进行了研究。研究主要集中在四个方面(图1-2)[17]55-73:(1)构建低变应原[37](hypoallergens),可通过添加或删除抗原表位、采用理化修饰改变蛋白结构,以消除天然过敏原的IgE反应活性或变应原性。(2)采用表位肽(epitope peptides)代替完整过敏原[38,39],T细胞表位肽不能与IgE发生交联,但可以触发CD4+T细胞并刺激具有T细胞调节功能的T细胞表位,以单个肽或肽混合物的形式递呈,以增强Th1和Treg细胞活性。猫主要过敏原Fel d 1的T细胞表位肽进行临床试验的结果表明,T细胞表位肽在猫过敏方面可诱导T细胞的转化,可能具有临床疗效,且治疗效果可能持续较长时间[40]。在对屋尘螨主要过敏原表位肽的研究中表明,这些表位肽不仅在体外实验中表现出较好的降低致敏性结果,并且在临床给药一年后仍然对机体产生持续的耐受效果[41]。同时,基于B细胞表位肽的疫苗在激活过敏原特异性T细胞和诱导过敏患者外周血单核细胞分泌促炎因子方面也具有较强的降低潜能[42]。(3)模拟表位肽(mimotopes)[43],模拟IgE结合表位的结构或序列的模拟表位肽,可以诱导机体产生能够识别过敏原的抗体,这些抗体可抑制机体食物过敏。文献表明过敏原特异性IgG4表位肽抗体可拮抗和阻断肥大细胞和嗜碱性细胞表面IgE引起的抗原反应,从而抑制效应细胞的活化和脱颗粒[44],进而起到AIT的作用。(4)构建共轭分子(conjugated molecules)[45],过敏原与具有免疫调节功能的分子偶联成共轭分子,可促进促耐药Treg细胞或Th1细胞的诱导。此外,在多种过敏动物模型中已证明,饮食及微生物可影响口服耐受性和过敏敏化进程[46],高脂饮食引起的微生物种类及数目的改变增加了机体对食物过敏的敏感性[47],而肠道中微生物分泌的组胺则影响了过敏性炎症的严重程度[48],因此可通过调节饮食、改善体内菌群组成等方式,达到预防或控制食物过敏的效果。细菌来源的高水平的短链脂肪酸的摄入可有效防止小鼠和人类过敏[49],采用食物过敏患儿的粪便菌群定植不能保护动物免受食物过敏,但健康儿童微生物菌群的定殖则可有效防止动物出现食物过敏情况[50];这表明肠道微生物可调节机体对食物抗原的过敏反应,意味着机体微生物的改变可能在一定程度上对食物过敏有显著的预防及治疗效果。
本研究的技术路线
【参考文献】：
期刊论文
[1]非热加工技术消减食物过敏原研究进展[J]. 郭颖希,王满生,成军虎,韩忠. 食品与机械. 2019(05)
[2]拟穴青蟹新型过敏原磷酸丙糖异构酶的鉴定分析[J]. 陈仲玮,费丹霞,杨阳,刘鹏源,蔡秋凤,张凌晶,曹敏杰,刘光明. 集美大学学报(自然科学版). 2016(06)
[3]储藏微环境对小麦蛋白质二级结构影响[J]. 赵妍,刘晓林,王若兰,马玉洁,杨俊. 粮食与油脂. 2014(01)
博士论文
[1]拟穴青蟹（Scylla paramamosain）肌浆蛋白过敏原的致敏性研究[D]. 杨阳.集美大学 2018
[2]酪蛋白抗氧化肽结构特征对其生物利用度的影响及其跨膜转运机制的研究[D]. 王波.中国农业大学 2016
硕士论文
[1]美拉德反应影响拟穴青蟹主要过敏原致敏性的机理研究[D]. 杨煌.集美大学 2019
[2]坛紫菜硫酸多糖和龙须菜硫酸多糖的抗腹泻活性研究[D]. 刘波.集美大学 2019
[3]拟穴青蟹肌质钙结合蛋白的过敏性研究[D]. 胡梦君.集美大学 2018
[4]牛羊乳酪蛋白抗原表位鉴定及热处理对其抗原性的影响[D]. 韩波.陕西科技大学 2018
[5]中国对虾（Penaeus chinensis）原肌球蛋白抗原表位和关键氨基酸的筛选及糖基化对其过敏原性的影响[D]. 王金宝.浙江工商大学 2018
[6]美拉德反应对鱼类小清蛋白免疫学性质及结构的影响[D]. 赵勇娟.集美大学 2016
[7]克氏原螯虾新型过敏原的鉴定与性质研究[D]. 张永霞.集美大学 2015
[8]克氏原螯虾过敏原的性质研究[D]. 陈亨莉.集美大学 2013
[9]蟹类过敏原的研究[D]. 梁银龙.集美大学 2008
本文编号：3613623
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