miRNA和MDV原癌基因Meq在鸡马立克氏病肿瘤转化过程中作用机制研究

发布时间：2023-02-14 18:21

　　鸡马立克氏病(MD)是由马立克氏病病毒(MDV)引起的噬淋巴细胞肿瘤性疾病。前期miRNA 组测序结果显示 gga-miR-219b、gga-miR-130b-3p 和 gga-miR-140-3p 在鸡感染 MDV 的肿瘤样本中显著下调。本研究中,我们选取这3个miRNAs和MDV原癌基因Meq作为研究对象,研究它们在MD肿瘤形成过程中的作用机制。过表达或抑制gga-miR-219b的试验结果表明,该miRNA抑制MD淋巴细胞MSB1迁移,并通过促进细胞凋亡而不是阻滞细胞周期使细胞增殖发生抑制,抑制细胞侵袭相关基因MMP2和MMP9的表达。这表明gga-miR-219b在MD肿瘤发生过程中发挥抑制作用。通过Targetscan和miRDB预测gga-miR-219b的候选靶基因,双荧光素酶基因报告试验证明B细胞慢性淋巴细胞性/淋巴瘤11B(BCL11B)是gga-miR-219b的一个直接靶基因。利用RNA干扰技术抑制BCL11B的表达,MSB1细胞增殖、迁移和侵袭情况与过表达gga-miR-219b结果类似,说明BCL11B基因在MD肿瘤转化过程中起到促进作用。过表达gga-miR...

【文章页数】：138 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
主要缩略词表
引言
    本研究的目的与意义
    总体试验设计与技术路线
第一章 文献综述
    1.1 马立克氏病概述
        1.1.1 马立克氏病病毒
        1.1.2 马立克氏病感染阶段
        1.1.3 马立克氏病流行与防控情况
        1.1.4 马立克氏病研究进展
    1.2 miRNA概述
        1.2.1 miRNA生成与作用机制
        1.2.2 miRNA与癌症
        1.2.3 miRNA与马立克氏病
        1.2.4 miR-219、miR-130和miR-140研究进展
    1.3 DNA甲基化概述
        1.3.1 DNA甲基化检测方法
        1.3.2 肿瘤中miRNA的异常表达与DNA甲基化
        1.3.3 马立克氏病的遗传抗性与DNA甲基化
第二章 gga-miR-219b和Meq在马立克氏病肿瘤转化过程中作用机制研究
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 试验样本
        2.2.2 主要试剂及药品
        2.2.3 主要仪器设备
        2.2.4 主要试剂配置
        2.2.5 试验方法与流程
        2.2.6 数据分析
    2.3 结果
        2.3.1 miRNA靶基因生物学预测
        2.3.2 gga-miR-219b和候选靶基因BCL11B在MDV引发的肿瘤化和未感染组织中的表达量
        2.3.3 双荧光素酶报告基因试验
        2.3.4 gga-miR-219b对MSB1细胞中靶基因BCL11B表达的影响
        2.3.5 gga-miR-219b对MSB1细胞特性的影响
        2.3.6 干扰靶基因BCL11B表达的siRNA筛选
        2.3.7 BCL11B干扰对MSB1细胞特性的影响
        2.3.8 gga-miR-219b和BCL11B干扰对MDV原癌基因Meq表达的影响
        2.3.9 Meq干扰对MSB1细胞特性的影响
        2.3.10 Meq干扰对BCL11B基因表达的影响
    2.4 讨论
        2.4.1 gga-miR-219b和靶基因BCL11B在马立克氏病肿瘤转化过程中的作用机制
        2.4.2 Meq基因在马立克氏病肿瘤转化过程中的作用机制
    2.5 小结
第三章 gga-miR-130b-3p在马立克氏病肿瘤转化过程中作用机制研究
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 试验样本
        3.2.2 主要试剂及药品
        3.2.3 主要仪器设备
        3.2.4 主要试剂配置
        3.2.5 试验方法与流程
    3.3 结果
        3.3.1 gga-miR-130b-3p在MDV引发的肿瘤化和未感染组织中的表达量
        3.3.2 肿瘤化和未感染脾脏中gga-miR-130b-3p编码基因上游的甲基化水平
        3.3.3 甲基化转移酶和去甲基化相关酶在肿瘤化和未感染脾脏中的差异表达
        3.3.4 gga-miR-130b-3p对MSB1细胞特性的影响
        3.3.5 gga-miR-130b-3p对MDV原癌基因Meq表达量的影响
    3.4 讨论
    3.5 小结
第四章 gga-miR-140-3p在马立克氏病肿瘤转化过程中作用机制研究
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 试验样本
        4.2.2 主要试剂及药品
        4.2.3 主要仪器设备
        4.2.4 主要试剂配置
        4.2.5 试验方法与流程
    4.3 结果
        4.3.1 gga-miR-140-3p在MDV引发的肿瘤化和未感染组织中的表达量
        4.3.2 gga-miR-140-3p对MSB1细胞增殖的影响
        4.3.3 gga-miR-140-3p对MSB1细胞迁移的影响
        4.3.4 gga-miR-140-3p对侵袭相关基因表达的影响
        4.3.5 gga-miR-140-3p对MDV原癌基因Meq表达量的影响
        4.3.6 gga-miR-219b、gga-miR-130b-3p和gga-miR-140-3p预测靶基因之间的互作关系
    4.4 讨论
    4.5 小结
第五章 结论
    5.1 结论
    5.2 创新点
    5.3 展望
参考文献
致谢
附录
个人简介



本文编号：3742781