致雏肉鸡“黑腺胃

发布时间：2023-02-27 18:02

　　禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli, APEC)能引起禽类局部或全身性感染。全身感染即大肠杆菌型败血症,主要特征是大肠杆菌存在于血液中,其发展阶段包括急性败血症、亚急性多发性浆膜炎和慢性肉芽肿性炎症。局部感染性禽大肠杆菌病包括大肠杆菌型脐炎／卵黄囊感染、大肠杆菌型蜂窝织炎、肿头综合征、生殖道感染、大肠杆菌型输卵管炎／腹膜炎和大肠杆菌型睾丸炎／附睾炎等。大量国内外研究表明,因地理区域不同,大肠杆菌血清型呈现多样性,但最常见的为O1、02、O35、O78。某些感染的暴发病例是由不常见的血清型造成的,如O111血清型分离株可造成产蛋母鸡发生多脏器的浆膜炎、败血症。还有一些致病性大肠杆菌菌株血清型不明确或者不能分型。近年来,在江苏、山东、安徽、河南等省规模化肉鸡养殖场频繁出现一种雏肉鸡“黑腺胃病”(暂命名),发病区域分散,发病日龄早,主要集中在3-5日龄,有时在7-8日龄出现,死淘率3%～12%。商品肉鸡出雏时外观健康,死亡前几无可见临诊症状。剖检病理变化以腺胃呈灰黑色为主(发黑程度随病情轻重而呈浅灰色或灰色,严重时呈黑色)、病程稍长者,可见心...

【文章页数】：147 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
第一篇 综述
    第一章 禽肠道外致病性大肠杆菌病的致病机理研究进展
        1 APEC的致病机理
            1.1 大肠杆菌型败血症
            1.2 局部性大肠杆菌病
        2 肠道外致病性大肠杆菌的毒力因子
            2.1 黏附素
            2.2 毒素
            2.3 铁摄取系统
            2.4 保护素
            2.5 侵袭素
            2.6 生物膜
        3 毒力基因的基因组定位
        参考文献
第二篇 试验研究
    第一章 致雏肉鸡“黑腺胃病”致病性大肠杆菌的分离鉴定
        1 材料
            1.1 病料
            1.2 菌株
            1.3 培养基
            1.4 试剂
                1.4.1 微量生化发酵管
                1.4.2 药敏纸片
                1.4.3 大肠杆菌0抗原诊断血清
                1.4.4 主要试剂
            1.5 主要仪器
            1.6 实验动物
            1.7 引物合成
        2 方法
            2.1 病毒分离
            2.2 细菌的分离培养
            2.3 细菌的纯化及保存
            2.4 细菌的鉴定
            2.5 O血清型鉴定
            2.6 1 日龄SPF鸡和Cobb肉鸡致死性试验
            2.7 组织病理学变化
            2.8 毒力基因检测
            2.9 种系发生分型
            2.10 药敏试验
            2.11 重金属检测
        3 结果
            3.1 病毒分离结果
            3.2 细菌的分离和生化试验鉴定
            3.3 0 血清型鉴定
            3.4 1 日龄SPF鸡和Cobb肉鸡致死性试验
            3.5 临床病死鸡及人工感染鸡病理变化
            3.6 大肠杆菌分离株毒力基因的检测情况
            3.8 种系发生分型
            3.9 药敏试验结果
            3.10 重金属检测
        4 讨论
        参考文献
    第二章 同一个体腺胃分离株和心血分离株毒力基因及致病性比较
        1 材料
            1.1 菌株
            1.2 培养基
            1.3 试剂
            1.4 实验动物
            1.5 引物合成
        2 方法
            2.1 细菌的鉴定
            2.2 生长曲线的测定
            2.3 半数致死量(LD50)测定
            2.4 体内定居与持续试验
            2.5 毒力基因检测
            2.6 种系发生分型
            2.7 多位点序列分型(MLST)
            2.8 脉冲场凝胶电泳分析
        3 结果
            3.1 细菌的鉴定
            3.2 生长曲线的测定
            3.3 4d/9-1 O142腺胃、4d/9-1 O142心血分离株半数致死量测定结果
            3.4 体内定居与持续试验
            3.5 大肠杆菌分离株毒力基因的检测情况
            3.6 种系发生分型
            3.7 多位点序列分型(MLST)
            3.8 脉冲场凝胶电泳分析
        4 讨论
        参考文献
    第三章 APEC O142腺胃分离株和心血分离株在鸡体内外的表达差异基因的筛选
        1 材料
            1.1 菌株
            1.2 主要仪器与设备
            1.3 主要药品及试剂
            1.4 主要生物信息学软件以及数据库
        2 方法
            2.1 细菌的复苏和培养
            2.2 大肠杆菌生化试验及溶血特性的鉴定
            2.3 大肠杆菌O血清型的鉴定
            2.4 SPF鸡血液中细菌的富集
            2.5 细菌的体外培养
            2.6 细菌RNA的提取
            2.7 RNA质量检查
            2.8 RNA纯化
            2.9 反转录、标记和杂交
            2.10 数据分析
            2.11 qRT-PCR对芯片结果的验证
        3 结果
            3.1 APEC的确认
            3.2 细菌RNA的提取
            3.3 APEC 4d/9-1腺胃分离株和心血分离株在鸡体内外基因表达水平的比较
            3.4 差异表达基因Gene ontology(GO)分析
            3.5 qRT-PCR验证结果
        4 讨论
        参考文献
    第四章 禽致病性大肠杆菌E491P株ompF、metF基因缺失株的构建及其生物学特性研究
        1 材料
            1.1 菌株和质粒
            1.2 主要试剂
            1.3 主要仪器
            1.4 分子生物学及数据分析软件
            1.5 试验鸡及试验鸡胚
            1.6 引物设计
        2 方法
            2.1 缺失株的构建
            2.2 生长曲线测定
            2.3 血清杀菌学试验
            2.4 1日龄鸡半数致死量(LD50)的测定
            2.5 35日龄SPF鸡感染体内动态分布试验
            2.6 组织病理学变化观察
        3 结果
            3.1 缺失株E491PΔompF和E491PΔmetF的构建及鉴定
            3.2 E491P及缺失株E491PΔompF、E491PΔmetF的生长曲线
            3.3 SPF鸡血清杀菌试验结果
            3.4 LD₅₀测定结果
            3.5 35日龄SPF鸡体内动态分布试验结果
            3.7 组织病理学变化
        4 讨论
        参考文献
全文总结
致谢
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本文编号：3751191