内生真菌Epichlo? bromicola菌种分离鉴定及其发酵物对拟南芥幼苗生长的影响

发布时间：2016-12-15 04:10

  本文关键词：内生真菌Epichlo? bromicola菌种分离鉴定及其发酵物对拟南芥幼苗生长的影响，由笔耕文化传播整理发布。

《内蒙古大学》 2015年

内生真菌Epichlo? bromicola菌种分离鉴定及其发酵物对拟南芥幼苗生长的影响

文先  

【摘要】：Epichloe属真菌是子囊菌门(Ascomycota)肉座菌目(Hypocreales)麦角菌科(Clavicipitaceae)的一类与冷季型禾草共生的真菌。有研究发现,从Epichloe属真菌发酵物中分离所得的化合物主要为生物碱类物质,其提高宿主植物抗虫活性和抗食草动物能力。本研究以薏苡内生真菌Epichloe属真菌为研究对象,通过分子生物学方法鉴定其菌种,并分析该菌发酵物对拟南芥幼苗生长的影响,为揭示内生真菌影响植物生长及其机制提供实验基础和科学依据。主要研究结果如下：1.本研究为了鉴定薏苡(Coix lachryma-jobi L. var. ma-yuen Stapf)内生真菌—Epichloe属的菌种,先提取了DNA并对其tub2和tef1基因序列进行了克隆及系统发育分析。结果显示,该菌株和Epichloe bromicola的亲缘关系最近,且在同一分支上。对其进一步进行同源序列比对分析,发现克隆所得tef1和tub2基因序列与Epichloe bromicola的tef1和tub2序列相似度分别为98.67%和98.8%。结合形态学分析,推测本论文所用的菌株为Epichloe bromicola。2.通过大量发酵Epichloe bromicola,将所得的发酵物使用75%乙醇提取,再用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,各萃取部位适量加到拟南芥幼苗1/2 MS培养基中,统计对拟南芥幼苗鲜重、拟南芥幼苗干重、拟南芥幼苗叶片数、拟南芥幼苗不定根数和拟南芥幼苗主根长等5个生物量的影响。统计结果表明,Epichloe bromicola能够促进拟南芥幼苗鲜重、干重、叶片数和不定根数等生物量的增加,且这与Epichloe bromicola次生代谢产物有关,具体作用物质集中在二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位；然而二氯甲烷部位、乙酸乙酯和正丁醇部位样品抑制拟南芥幼苗主根生长。3.为了寻找影响拟南芥幼苗生长的物质基础,通过UPLC-HRMS法分析促进拟南芥幼苗生长的二氯甲烷和乙酸乙酯部位。结果发现,二氯甲烷和乙酸乙酯部位样品中都检测到了生长素吲哚乙酸、吲哚甲醛和吲哚乙醇等物质,故影响拟南芥幼苗生长的物质有可能是生长素类物质,后续还需从生长素早期应答相应基因转录等方面着手去进一步研究阐明其作用机制。

【关键词】：
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：Q93;S567.219

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