铁皮石斛三种病害的病原菌鉴定及防控措施
发布时间：2021-08-27 07:08
铁皮石斛,兰科石斛兰属多年生草本植物。现代药理学研究证明其成分具有多种功效,在食用、药用等方面都体现出一定的价值。但铁皮石斛对生长环境和气候条件要求十分苛刻,且生长发育缓慢,野生资源十分稀缺。20世纪90年代,浙江省在全国率先开始铁皮石斛的规模化种植和产业化开发,目前已是铁皮石斛种植与深加工产业的主要分布地。然而,铁皮石斛的人工栽培往往是大棚设施栽培且高密度栽培,棚内湿度大、通风不良、相对闷热,非常利于病害的发生,浙江省又地处亚热带,夏季高温高湿,梅雨季持续时间久,导致病害的发生更加持久、普遍。为明确浙江省几种常见的铁皮石斛病害的病原物,以及筛选出适合铁皮石斛生长的绿色防控措施和高效低毒低残留的化学应急技术,本文进行了一些初步的研究探索。主要研究结果如下:（1）通过对铁皮石斛种植基地的病害发生规律调查,病害典型症状样本的采集、病原菌的分离、纯化、致病性测定、形态观察、rDNA-ITS序列分析等,明确引起铁皮石斛白绢病的病原菌为齐整小核菌Sclerotium rolfsii,该病发生高峰期为高温高湿的梅雨季节或夏、秋高温季节;明确引起铁皮石斛轮纹病的病原菌为露湿漆斑菌Myrotheciu...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
设施栽培铁皮石斛不同栽培方式
浙江大学硕士学位论文铁皮石斛白绢病的病原物鉴定及防控措施1912d左右可见淡黄色油菜籽状菌核，不均匀地分布在培养基表面，30d后变为黄褐色（图2.2-e）。在菌核形成过程中，培养基上产生大量水珠，后期减少。此形态指标与齐整小核菌Sclerotiumrolfsii一致。图2.2铁皮石斛白绢病田间发病症状、致病性测定结果及病原菌特征Fig.2.2ThesymptomsofDendrobiumofficinalesouthernblight,resultsofpathogenicityandmorphologicalcharactersofSclerotiumrolfsiia～b：田间发病症状；c：致病性测定结果；d：在PDA上5d大小的菌落；e：在PDA上30d大小的菌落a～b：thesymptomsinthefield；c：resultsofpathogenicity；d：5doldcolonyonPDA；e：30doldcolonyandsclerotiaonPDA2.2.4病原菌的分子鉴定以分离菌株SR1的基因组DNA为模板，用ITS通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增，得到约650bp的PCR产物，PCR产物测序结果用BLAST软件在GenBank中进行同源性比对（登录号为KU854983）。比对结果表明株菌与齐整
浙江大学硕士学位论文铁皮石斛轮纹病的病原物鉴定及防控措施31图3.1铁皮石斛轮纹病田间发病症状、致病性测定结果及病原菌特征Fig.3.1ThesymptomsofDendrobiumofficinaleringrot,resultsofpathogenicityandmorphologicalcharactersofMyrotheciumroriduma：田间发病症状；b：致病性测定结果；c：PDA上菌落正面；d：PDA上菌落背面；e：分生孢子梗；f：分生孢子a：thesymptomsinthefield；b：resultsofpathogenicity；c：topofthecolonyonPDA；d：bottomofthecolonyonPDA；e：sporodochia；f：conidiophore.3.2.4病原菌的分子生物学特征分别以分离菌株TPLW01、TPLW02、TPLW03、TPLW04和TPLW05的基因组DNA为模板，用ITS通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增，扩增产物电泳后在紫外透射仪中观察可见各菌株分别扩增出约600bp的PCR产物（图3.2），PCR产物测序所得的rDNA-ITS序列提交至GenBank，获得上述5株菌对应的GenBank登录号分别为MF939638、MF939639、MF939640、MF939641、MF939642。BLAST搜索和比对结果表明这5株菌与露湿漆斑菌（登录号为KX421205.1）的同源相性为100.0%。通过系统发育树分析表明，铁皮石斛轮纹病病原菌与露湿漆斑菌同源性最高，位于系统发育树的同一分支，支持率为66％(图3.3)。进一步证实了分离菌株TPLW01、TPLW02、TPLW03、TPLW04和TPLW05为露湿漆斑菌。
【参考文献】：
期刊论文
[1]兰科药用植物活性多糖研究进展[J]. 张明泽,何春梅,王浩斌,俞振明,司灿,赵聪慧,段俊. 热带亚热带植物学报. 2019(05)
[2]我国铁皮石斛产业发展研究[J]. 王枫,石红青. 中国林业经济. 2019(03)
[3]铁皮石斛茎、叶、花中黄酮含量及其体外抗氧化活性研究[J]. 李芳,魏云,陈艳杰. 中医学报. 2019(05)
[4]一种无公害铁皮石斛仿野生栽培方法[J]. 淦国英. 农业与技术. 2019(05)
[5]铁皮石斛白绢病发生规律研究[J]. 陈秋燕,陈东红,石艳,斯王肃,吴令上,斯金平. 中国中药杂志. 2019(09)
[6]铁皮石斛炭疽病病原菌的分离鉴定及其有效杀菌剂的筛选[J]. 赵玲琳,王国荣,沈伟东,孙超,沈肖玲,邱春英,王翔,沈益平,楼兵干. 植物保护. 2018(06)
[7]浙江省中药材2017年产销形势及发展对策[J]. 马蕾,何伯伟,徐丹彬. 浙江农业科学. 2018(11)
[8]铁皮石斛炭疽病病原鉴定及其生物学特性研究[J]. 胡永亮,白学慧,陈玉芹,李守岭,王应清. 中国森林病虫. 2019(02)
[9]铁皮石斛加工制品研究现状[J]. 胡秦佳宝,朱亚雄. 保鲜与加工. 2019(01)
[10]铁皮石斛轮纹病病原菌鉴定及其防治药剂筛选[J]. 沈伟东,赵玲琳,王国荣,邱春英,王翔,楼兵干. 植物保护学报. 2018(04)
硕士论文
[1]铁皮石斛栽培条件对品质的影响及栽培技术规范研究[D]. 林文亮.集美大学 2019
[2]铁皮石斛常见真菌病害的鉴定及复合菌剂的应用研究[D]. 李梦娇.云南农业大学 2017
[3]14种观赏植物17种真菌病害的病原鉴定[D]. 王晓阳.华南农业大学 2016
[4]铁皮石斛病原真菌分离与鉴定及印度梨形孢促生作用研究[D]. 曹星星.浙江大学 2015
本文编号：3365902
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
设施栽培铁皮石斛不同栽培方式
浙江大学硕士学位论文铁皮石斛白绢病的病原物鉴定及防控措施1912d左右可见淡黄色油菜籽状菌核，不均匀地分布在培养基表面，30d后变为黄褐色（图2.2-e）。在菌核形成过程中，培养基上产生大量水珠，后期减少。此形态指标与齐整小核菌Sclerotiumrolfsii一致。图2.2铁皮石斛白绢病田间发病症状、致病性测定结果及病原菌特征Fig.2.2ThesymptomsofDendrobiumofficinalesouthernblight,resultsofpathogenicityandmorphologicalcharactersofSclerotiumrolfsiia～b：田间发病症状；c：致病性测定结果；d：在PDA上5d大小的菌落；e：在PDA上30d大小的菌落a～b：thesymptomsinthefield；c：resultsofpathogenicity；d：5doldcolonyonPDA；e：30doldcolonyandsclerotiaonPDA2.2.4病原菌的分子鉴定以分离菌株SR1的基因组DNA为模板，用ITS通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增，得到约650bp的PCR产物，PCR产物测序结果用BLAST软件在GenBank中进行同源性比对（登录号为KU854983）。比对结果表明株菌与齐整
浙江大学硕士学位论文铁皮石斛轮纹病的病原物鉴定及防控措施31图3.1铁皮石斛轮纹病田间发病症状、致病性测定结果及病原菌特征Fig.3.1ThesymptomsofDendrobiumofficinaleringrot,resultsofpathogenicityandmorphologicalcharactersofMyrotheciumroriduma：田间发病症状；b：致病性测定结果；c：PDA上菌落正面；d：PDA上菌落背面；e：分生孢子梗；f：分生孢子a：thesymptomsinthefield；b：resultsofpathogenicity；c：topofthecolonyonPDA；d：bottomofthecolonyonPDA；e：sporodochia；f：conidiophore.3.2.4病原菌的分子生物学特征分别以分离菌株TPLW01、TPLW02、TPLW03、TPLW04和TPLW05的基因组DNA为模板，用ITS通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增，扩增产物电泳后在紫外透射仪中观察可见各菌株分别扩增出约600bp的PCR产物（图3.2），PCR产物测序所得的rDNA-ITS序列提交至GenBank，获得上述5株菌对应的GenBank登录号分别为MF939638、MF939639、MF939640、MF939641、MF939642。BLAST搜索和比对结果表明这5株菌与露湿漆斑菌（登录号为KX421205.1）的同源相性为100.0%。通过系统发育树分析表明，铁皮石斛轮纹病病原菌与露湿漆斑菌同源性最高，位于系统发育树的同一分支，支持率为66％(图3.3)。进一步证实了分离菌株TPLW01、TPLW02、TPLW03、TPLW04和TPLW05为露湿漆斑菌。
【参考文献】：
期刊论文
[1]兰科药用植物活性多糖研究进展[J]. 张明泽,何春梅,王浩斌,俞振明,司灿,赵聪慧,段俊. 热带亚热带植物学报. 2019(05)
[2]我国铁皮石斛产业发展研究[J]. 王枫,石红青. 中国林业经济. 2019(03)
[3]铁皮石斛茎、叶、花中黄酮含量及其体外抗氧化活性研究[J]. 李芳,魏云,陈艳杰. 中医学报. 2019(05)
[4]一种无公害铁皮石斛仿野生栽培方法[J]. 淦国英. 农业与技术. 2019(05)
[5]铁皮石斛白绢病发生规律研究[J]. 陈秋燕,陈东红,石艳,斯王肃,吴令上,斯金平. 中国中药杂志. 2019(09)
[6]铁皮石斛炭疽病病原菌的分离鉴定及其有效杀菌剂的筛选[J]. 赵玲琳,王国荣,沈伟东,孙超,沈肖玲,邱春英,王翔,沈益平,楼兵干. 植物保护. 2018(06)
[7]浙江省中药材2017年产销形势及发展对策[J]. 马蕾,何伯伟,徐丹彬. 浙江农业科学. 2018(11)
[8]铁皮石斛炭疽病病原鉴定及其生物学特性研究[J]. 胡永亮,白学慧,陈玉芹,李守岭,王应清. 中国森林病虫. 2019(02)
[9]铁皮石斛加工制品研究现状[J]. 胡秦佳宝,朱亚雄. 保鲜与加工. 2019(01)
[10]铁皮石斛轮纹病病原菌鉴定及其防治药剂筛选[J]. 沈伟东,赵玲琳,王国荣,邱春英,王翔,楼兵干. 植物保护学报. 2018(04)
硕士论文
[1]铁皮石斛栽培条件对品质的影响及栽培技术规范研究[D]. 林文亮.集美大学 2019
[2]铁皮石斛常见真菌病害的鉴定及复合菌剂的应用研究[D]. 李梦娇.云南农业大学 2017
[3]14种观赏植物17种真菌病害的病原鉴定[D]. 王晓阳.华南农业大学 2016
[4]铁皮石斛病原真菌分离与鉴定及印度梨形孢促生作用研究[D]. 曹星星.浙江大学 2015
本文编号：3365902
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