基于核酸适配体和氯化血红素荧光检测蜂蜜中的氯霉素与四环素

发布时间：2022-10-08 16:12

　　由于抗生素具有抑菌和杀菌作用,在蜂业养殖中常被非法使用,导致消费者可能长期低剂量摄入抗生素危害健康。因此,本文基于核酸适配体与目标物的特异性识别,分别建立了针对氯霉素（CAP）和四环素（TC）的荧光检测方法,并用于蜂蜜中CAP与TC的检测。论文主要内容如下:第一部分,基于核酸适配体与可调节催化活性的氯化血红素模拟酶检测蜂蜜中CAP。氯化血红素（hemin）单体催化活性高,可以催化过氧化氢（H₂O₂）氧化酪胺产生荧光,而hemin二聚体催化活性低无法进行有效催化反应。将hemin单体分别修饰在CAP适配体的3’端及适配体互补链的5’端,由于形成双链结构,使hemin形成二聚体。当CAP存在时,适配体与CAP结合,双链解离,hemin二聚体分离成为单体形态,可催化酪胺氧化而产生荧光,以320 nm为激发波长,通过在410 nm处测定溶液的荧光强度可对CAP进行定量检测。在优化条件下,CAP的检测线性范围为0.1~10 ng mL^-1,检出限为0.07 ng mL^-1。将此方法用于蜂蜜中CAP的检测,加标... 

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 抗生素及其检测方法
        1.1.1 氯霉素和四环素
        1.1.2 氯霉素和四环素的检测方法
    1.2 核酸适配体
    1.3 四面体DNA纳米结构
    1.4 过氧化物模拟酶
        1.4.1 过氧化物模拟酶简介
        1.4.2 氯化血红素(hemin)
    1.5 论文立意及研究内容
        1.5.1 论文立意
        1.5.2 研究内容
第2章 基于可调节催化活性的模拟酶与核酸适配体检测蜂蜜中氯霉素
    2.1 引言
    2.2 试验部分
        2.2.1 主要试剂与仪器
        2.2.2 P1-P2 双链DNA合成
        2.2.3 氯霉素检测
        2.2.4 选择性
        2.2.5 实际样品检测及方法验证
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 检测原理
        2.3.3 检测条件优化
        2.3.4 线性范围
        2.3.5 选择性
        2.3.6 蜂蜜样品检测与ELISA试剂盒检测
    2.4 本章小结
第3章 构建基于四面体DNA纳米结构修饰的磁性微球用于目标DNA的检测
    3.1 引言
    3.2 试验部分
        3.2.1 主要试剂与仪器
        3.2.2 四面体DNA结构合成
        3.2.3 适配体与磁性微球的连接及密度测定
        3.2.4 目标DNA检测
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 检测原理
        3.3.2 四面体DNA结构合成
        3.3.3 检测适配体的表征及密度测定
        3.3.4 HCR反应表征
        3.3.5 检测时间比较
        3.3.6 检测抗干扰能力比较
        3.3.7 检测灵敏度比较
    3.4 本章小结
第4 章四面体DNA纳米结构修饰的磁性微球用于蜂蜜中四环素的检测
    4.1 引言
    4.2 试验部分
        4.2.1 主要试剂与仪器
        4.2.2 四面体DNA结构合成
        4.2.3 磁性微球表面四面体DNA连接及密度测定
        4.2.4 四环素检测
        4.2.5 选择性试验
        4.2.6 实际样品检测与ELISA试剂盒验证
    4.3 结果与讨论
        4.3.0 检测原理
        4.3.1 四面体DNA结构合成及表征
        4.3.2 荧光显微镜表征HCR反应
        4.3.3 检测条件优化
        4.3.4 线性范围
        4.3.5 选择性
        4.3.6 蜂蜜样品四环素的检测
    4.4 本章小结
第5章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
    5.3 创新点
致谢
参考文献
在学期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]基于杂交链式反应的适配体传感器用于卡那霉素的比色检测[J]. 田润,陶晴,卞晓军,朱福琳,颜娟.  分析化学. 2020(05)
[2]功能化核酸适体检测氯霉素可行性研究[J]. 陈盼,禹思宇,胡忆文,唐连飞,谭建锡.  食品安全质量检测学报. 2020(01)
[3]环丙沙星-固体脂质纳米粒的制备及抗菌效果[J]. 陈胜广,马俊花,王菁楠,朱鸿玲,顾明君.  同济大学学报(医学版). 2019(06)
[4]高效液相色谱法测定地表水中四环素类抗生素[J]. 周晚晴,黄金飞,金小玲,李键,卢浈乐,叶明立,陈梅兰.  化学试剂. 2020(02)
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[6]基于核酸适配体的电化学法检测铅离子[J]. 高金娥,戴先凯.  食品安全质量检测学报. 2019(18)
[7]基于G-四链体-氯化血红素DNA酶比色法测定银离子和汞离子传感器的构筑[J]. 肖志友,司恒丹,邓兰清,龙丽,居荣梅,张鑫,刘益飞.  分析测试学报. 2019(07)
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[10]氯霉素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[J]. 范素菊,杨兴东,高润.  中国畜牧兽医. 2018(09)



本文编号：3688021