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超高效液相色谱-四极杆静电场轨道离子阱质谱分析沼虾过敏原蛋白

发布时间:2022-11-06 15:16
  目的建立超高效液相色谱-四极杆静电场轨道离子阱质谱法,分析沼虾中的过敏原蛋白。方法基于Bottomup(自下而上)蛋白分析策略,采用Tris-HCl提取罗氏沼虾样品中的目标蛋白,胰蛋白酶40℃消化6 h,肽段经过色谱分离后采用四极杆静电场轨道离子阱质谱(Full MS/dd-MS~2监测模式,TopN=10)测定,利用UniProt蛋白数据库和Proteome Discoverer软件鉴定过敏原蛋白。结果获得4种过敏原蛋白,分别为原肌球蛋白、精氨酸激酶、肌浆钙结合蛋白和血蓝蛋白,肽段覆盖率分别为53%、36%、12%和12%,翻译后修饰的位点有天冬氨酸(D)的甲基化,天冬酰氨(N)和谷氨酰氨(Q)的脱酰氨化以及蛋氨酸(M)的氧化。结论超高效液相色谱-四极杆静电场轨道离子阱质谱能获得丰富的肽段及碎片信息,灵敏度和分辨率较高,可用于虾及虾制品的过敏原蛋白鉴定和分析。 

【文章页数】:4 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 样品和试剂
    1.2 样品前处理方法
    1.3 色谱和质谱条件
    1.4 质谱数据分析
2 结果
    2.1 酶解处理过程优化
    2.2 主要过敏原蛋白及肽段鉴定
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
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[7]定量蛋白质组学质谱采集技术进展[J]. 张伟.  分析化学. 2014(12)
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本文编号:3703731

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