柑橘中黄龙病菌效应子SDE70的表达特征及寄主互作蛋白解析

发布时间：2021-10-08 00:10

　　柑橘黄龙病菌主要致病种亚洲种（‘Candidatus Liberibacter asiaticus’,Las）具有完整的Sec依赖型分泌系统,可分泌致病因子（效应子）作用于寄主靶标蛋白或基因,调控寄主的抗（感）病反应。为了研究黄龙病菌Sec依赖型效应子在柑橘中的致病机理及其寄主靶标基因,本研究中从感病‘锦橙’中克隆了Las病原菌Sec依赖型效应子基因SDE70（CLIBASIA₀2470）。生物信息分析显示,SDE70蛋白全长132个氨基酸,N端20个氨基酸为典型信号肽。大肠杆菌碱性磷酸酶活性分析显示,该信号肽具有胞外分泌功能。亚细胞定位显示,SDE70::GFP融合蛋白在洋葱细胞质和细胞核中积累。定量PCR分析发现,耐黄龙病酸柚显症叶脉中SDE70表达量显著低于未显症叶脉,相反,易感黄龙病‘锦橙’显症叶脉中表达显著高于未显症叶脉;‘锦橙’根中SDE70表达量显著高于叶脉,而幼叶叶脉中显著低于老叶。SDE70在不同品种不同症状发育时期以及不同组织中表达差异显著。利用酵母双杂交试验筛选获得26个与SDE70互作的柑橘蛋白。GO富集分析表明,42.3%的蛋白质与细胞内... 

【文章来源】：园艺学报. 2020,47(08)北大核心CSCD

【文章页数】：12 页

【部分图文】：

SDE70蛋白二级结构预测分析

如图3，携带已知信号肽的阳性对照PET-phoA与含基因全长的融合蛋白PET-SDE70::mpohA为深蓝色菌斑，而阴性对照与去掉信号肽序列的融合蛋白PET-trSDE70::mpohA为浅蓝色菌斑，表明SDE70效应子N端20个氨基酸序列为具有分泌功能的信号肽。图3 SDE70蛋白质信号肽验证

图4所示，转入35S::SDE70:GFP融合基因的洋葱表皮细胞中荧光分布均匀，与转35S::GFP基因相似，均在细胞质、细胞核、质膜中分布，但前者在细胞核中荧光较强。2.4 SDE70在柑橘中的表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]ADP核糖基化因子的结构及其功能机制[J]. 王磊,宿红艳,王昌留,穆春华.  细胞生物学杂志. 2007(05)

博士论文
[1]柑橘黄龙病的细胞病理及其寄主转录组学研究[D]. 傅仕敏.西南大学 2014
[2]中国柑橘黄龙病病原调查、种群遗传分化及其原噬菌体溶菌酶蛋白原核表达[D]. 苏华楠.西南大学 2013

硕士论文
[1]CsSAMT-1基因在水杨酸信号响应柑橘黄龙病侵染中的功能研究[D]. 白晓晶.西南大学 2018



本文编号：3423051