阳离子脂质体为载体的基因体内递送效果研究
发布时间：2021-03-18 09:44
目的：考察自制的阳离子脂质体作为载体，在小鼠体内递送DNA及RNA的效果及其体内安全性。方法：（1）以荧光素酶为目的基因，分别以自制的8种阳离子脂质体为载体，对携带荧光素酶基因的质粒pGFP-N2在小鼠体内进行转染。通过Western Blotting检测转染后小鼠肺和肝脏中荧光素酶的表达，评价阳离子脂质体在小鼠体内递送DNA的效果。（2）以自制的4种阳离子脂质体为载体转染小鼠，对载脂蛋白B（Apoplipoprotein B，Apo B）进行体内RNA干扰。RT-PCR检测小鼠肝脏中ApoBmRNA的表达，ELISA、Western Blotting检测小鼠肝脏及血浆中Apo B蛋白的表达，评价阳离子脂质体在小鼠体内递送siRNA的效果。（3）在进行体内转染的同时通过考察小鼠的体重变化、内脏变化、死亡率等指标评价所用阳离子脂质体的体内安全性。结果：（1）以自制的8种阳离子脂质体9、10、17、19、20、21、22、CD01为载体进行体内DNA转染，通过Western Blotting检测到转染组小鼠肝脏和肺中有荧光素酶蛋白的表达，表明所考察的阳离子脂质体均有体内递送DNA的作用，且...
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
脂质体CD01为转染载体时小鼠肝脏中荧光素酶蛋白的表达
图 2 脂质体 10 为转染载体时小鼠肺中荧光素酶蛋白的表达Fig.2 Expression of luciferase in mice lungs using liposome 10 as a carriertern Blotting analysis for luciferase in lungs of the tested mice. M:luciferase;N:Ncontrol;1,2,3,4:liposome 10;5: Adding no carrier.以脂质体 10 为载体壳聚糖为促进剂转染时小鼠肝和肺组织中荧达一步考察以阳离子脂质体 10 作为载体，壳聚糖为粘附剂和吸收促的影响。转染 48h，以 Western Blotting 的方法检测小鼠肝（图 3A 3B）中荧光素酶蛋白的表达，结果表明壳聚糖对转染具有促进作，加入壳聚糖后荧光素酶蛋白的表达量高于仅用脂质体 10 的情况
图 2 脂质体 10 为转染载体时小鼠肺中荧光素酶蛋白的表达Fig.2 Expression of luciferase in mice lungs using liposome 10 as a carrierstern Blotting analysis for luciferase in lungs of the tested mice. M:luciferase;N:Negcontrol;1,2,3,4:liposome 10;5: Adding no carrier.3 以脂质体 10 为载体壳聚糖为促进剂转染时小鼠肝和肺组织中荧光达进一步考察以阳离子脂质体 10 作为载体，壳聚糖为粘附剂和吸收促进的影响。转染 48h，以 Western Blotting 的方法检测小鼠肝（图 3A） 3B）中荧光素酶蛋白的表达，结果表明壳聚糖对转染具有促进作用，加入壳聚糖后荧光素酶蛋白的表达量高于仅用脂质体 10 的情况。
【参考文献】：
期刊论文
[1]尾静脉大容量快速注射法介导的人凝血因子Ⅸ基因在小鼠肝内的高效表达[J]. 贺晨霞,冯登敏,陈立,陈浩明,姚纪花,沈琦,卢大儒,薛京伦,吴文君,丁友法. 科学通报. 2003(05)
本文编号：3088127
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
脂质体CD01为转染载体时小鼠肝脏中荧光素酶蛋白的表达
图 2 脂质体 10 为转染载体时小鼠肺中荧光素酶蛋白的表达Fig.2 Expression of luciferase in mice lungs using liposome 10 as a carriertern Blotting analysis for luciferase in lungs of the tested mice. M:luciferase;N:Ncontrol;1,2,3,4:liposome 10;5: Adding no carrier.以脂质体 10 为载体壳聚糖为促进剂转染时小鼠肝和肺组织中荧达一步考察以阳离子脂质体 10 作为载体，壳聚糖为粘附剂和吸收促的影响。转染 48h，以 Western Blotting 的方法检测小鼠肝（图 3A 3B）中荧光素酶蛋白的表达，结果表明壳聚糖对转染具有促进作，加入壳聚糖后荧光素酶蛋白的表达量高于仅用脂质体 10 的情况
图 2 脂质体 10 为转染载体时小鼠肺中荧光素酶蛋白的表达Fig.2 Expression of luciferase in mice lungs using liposome 10 as a carrierstern Blotting analysis for luciferase in lungs of the tested mice. M:luciferase;N:Negcontrol;1,2,3,4:liposome 10;5: Adding no carrier.3 以脂质体 10 为载体壳聚糖为促进剂转染时小鼠肝和肺组织中荧光达进一步考察以阳离子脂质体 10 作为载体，壳聚糖为粘附剂和吸收促进的影响。转染 48h，以 Western Blotting 的方法检测小鼠肝（图 3A） 3B）中荧光素酶蛋白的表达，结果表明壳聚糖对转染具有促进作用，加入壳聚糖后荧光素酶蛋白的表达量高于仅用脂质体 10 的情况。
【参考文献】：
期刊论文
[1]尾静脉大容量快速注射法介导的人凝血因子Ⅸ基因在小鼠肝内的高效表达[J]. 贺晨霞,冯登敏,陈立,陈浩明,姚纪花,沈琦,卢大儒,薛京伦,吴文君,丁友法. 科学通报. 2003(05)
本文编号：3088127
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