基于GC/MS技术的脂肪酸代谢轮廓谱方法和应用研究

发布时间：2021-05-16 20:01

　　包含脂肪酸代谢在内的脂质代谢循环,一直以来就是糖尿病、心血管病等重大疾病发生机理的研究热点。本文采用GC/MS技术对脂肪酸代谢组学进行研究。建立了一种脂肪酸代谢轮廓谱方法,详细考察了血浆用量、衍生化方法、脂肪酸提取分离、内标/外标法选定等分析条件对定量结果的影响。该方法实现了对25种酯化脂肪酸（EFAs）和25种非酯化脂肪酸（NEFAs）同时定性,及其中15种EFAs和15种NEFAs的精确定量。方法学考察结果表明,该方法线性良好,相关系数大于0.997；日内,日间RSDs小于15%；脂肪酸加标回收率（高、中、低浓度）为80-110%。该法仅需用10μL血浆或血清样本,较文献报道用量（150-300μL）大为减少。将建立的脂肪酸代谢轮廓谱方法用于糖尿病、糖尿病肾病的临床代谢组学研究。定量测定了血浆中15种EFAs和15种NEFAs.基于所得定量数据,对脂肪酸总体水平、各类脂肪酸水平、各个脂肪酸水平以及多个脂肪酸含量比值等变化进行分析,探讨了脂肪酸代谢水平变化与糖尿病、糖尿病肾病发病机理之间的关系。采用PLS-DA等模式识别技术,对所得脂肪酸测定结果进行聚类分析,各组样本聚集成类,体现了... 

【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：125 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 课题背景
    1.2 代谢组学概述
        1.2.1 代谢组学发展现状
        1.2.2 代谢组学及其研究目的和层次
        1.2.3 代谢组学研究内容和应用
        1.2.4 代谢组学研究方法和流程
    1.3 GC/MS技术及其应用
        1.3.1 色谱质谱联用技术简介
        1.3.2 气相色谱分析对象及其衍生化
        1.3.3 质谱仪的基本结构和功能
        1.3.4 GC/MS的条件优化和数据采集
        1.3.5 GC/MS技术在代谢组学研究中的应用概况
    1.4 本论文的主要内容和主要贡献
        1.4.1 本论文的主要内容
        1.4.2 本论文的主要贡献和创新点
第2章 血浆/血清脂肪酸GC/MS代谢轮廓谱方法学的建立
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 试剂
        2.2.2 仪器
        2.2.3 溶液配制
        2.2.4 衍生化方法
        2.2.5 血浆样本的预处理
        2.2.6 数据采集和数据处理
    2.3 结果和讨论
        2.3.1 外标法的选择
        2.3.2 样本用量的选择
        2.3.3 衍生化条件的选择和优化
        2.3.4 提取分离方法的确定
        2.3.5 仪器参数的优化
        2.3.6 方法学考察
    2.4 本章小结
第3章 糖尿病、糖尿病肾病脂肪酸代谢轮廓分析及其用于临床代谢组学研究
    3.1 背景介绍
        3.1.1 代谢综合征与DM,DN的关系
        3.1.2 DM,DN中的脂代谢紊乱
    3.2 人血浆中EFAs和NEFAs定量代谢轮廓研究
        3.2.1 实验部分
        3.2.2 人血浆脂肪酸定性、定量结果
        3.2.3 糖尿病、糖尿病肾病的西医横断面分析及其病理阐释
        3.2.4 糖尿病肾病的中医学分型分析及其病理学阐释
        3.2.5 糖尿病-糖尿病肾病相关的中西医初步对比
    3.3 本章小结
第4章 营养干预前后育龄期妇女血清脂肪酸代谢变化研究
    4.1 背景介绍
    4.2 实验部分
        4.2.1 样本来源
        4.2.2 试剂和材料
        4.2.3 仪器
        4.2.4 标准曲线制备
        4.2.5 样本预处理
        4.2.6 数据采集和数据处理
    4.3 结果和讨论
        4.3.1 实验设计
        4.3.2 定量结果
        4.3.3 数据处理
        4.3.4 营养素干预可能对脂肪酸代谢及神经管闭合造成的影响
    4.4 本章小结
第5章 GC/MS技术用于其它生物复杂样品研究
    5.1 GC/MS用于多元醇含量测定及其微生物发酵过程控制研究
        5.1.1 实验部分
        5.1.2 方法学考察
        5.1.3 结果和讨论
        5.1.4 小结
    5.2 川芎当归的挥发油成分和药用功效对比研究
        5.2.1 前言
        5.2.2 实验部分
        5.2.3 结果和讨论
        5.2.4 小结
    5.3 本章小结
结论
参考文献
致谢
附录:本人攻读博士期间已发表和待发表的论文
附表


【参考文献】：
期刊论文
[1]92例围产期胎儿神经管畸形分析及文献复习[J]. 陈玲玲,杨惠英.  中国优生与遗传杂志. 2008(04)
[2]代谢组学技术及其在临床研究中的应用[J]. 李灏,姜颖,贺福初.  遗传. 2008(04)
[3]代谢组学、药物代谢组学与中医药现代化[J]. 林景超,李后开,周明眉,贾伟.  中国医学科学院学报. 2007(06)
[4]代谢物组学应用的领域之四——毒理代谢物组学[J]. 吴娟芳,梁琼麟,冉小蓉,罗国安,王义明.  中成药. 2007(02)
[5]代谢物组学应用的领域之五——营养代谢物组学[J]. 冉小蓉,罗国安,梁琼麟,温华珍,王义明.  中成药. 2007(01)
[6]代谢物组学应用的领域之三——诊断代谢物组学[J]. 赵基源,梁琼麟,冉小蓉,罗国安,王义明.  中成药. 2006(12)
[7]代谢物组学应用的领域之二——植物代谢物组学[J]. 刘祥东,罗国安,王义明.  中成药. 2006(10)
[8]B超诊断胎儿神经系统畸形及临床意义[J]. 任艳春.  中国优生与遗传杂志. 2006(07)
[9]代谢组学在中医药复杂理论体系研究中的应用[J]. 贾伟,蒋健,刘平,赵立平,陈闽军,周明眉,杨丽萍,王米渠,邱明丰,张永煜.  中国中药杂志. 2006(08)
[10]化学物质组学与中药方剂研究——兼析清开灵复方物质基础研究[J]. 罗国安,梁琼麟,张荣利,王义明,刘清飞,胡坪.  世界科学技术. 2006(01)

博士论文
[1]疾病代谢物的色谱—质谱分析方法研究[D]. 李宁.复旦大学 2008
[2]一氧化氮合酶与神经管畸形关系的研究[D]. 胡淑敏.中国医科大学 2007
[3]复方川芎当归对血管细胞作用机理[D]. 侯永忠.天津大学 2004



本文编号：3190310