重组腺病毒载体马尔堡病毒病疫苗的构建与免疫学评价

发布时间：2021-05-20 15:32

　　马尔堡病毒是最早发现的丝状病毒,能够感染人和非人灵长类动物,引起急性出血热症状,具有极高的传染性和致死率,而且存在通过气溶胶传播的可能性,是一种潜在的生物战剂,因此研发针对此病毒的疫苗势在必行。马尔堡病毒包膜糖蛋白是病毒的主要致病成分,在病毒感染、入侵细胞过程中发挥主要功能,目前正在研制的MARV疫苗大多基于该抗原设计。本研究以5型腺病毒作为载体,设计并制备纯化了马尔堡病毒病疫苗,随后在小鼠和豚鼠模型上评价了它的免疫原性。在疫苗设计过程中,我们选择致病性最强的马尔堡病毒安哥拉株（2004-2005年流行于安哥拉地区,致死率90%）作为研究对象,以其包膜糖蛋白为疫苗的靶标抗原,对其基因组进行密码子优化,合成优化与未优化的包膜糖蛋白基因,分别克隆至Ad Max腺病毒系统的穿梭质粒pDC316上。通过共转染HEK293细胞的方式使穿梭质粒与AdMax腺病毒系统的骨架质粒（pBHGlox-E1,3Cre）发生位点特异重组,包装出能够表达马尔堡病毒包膜糖蛋白的复制缺陷型重组腺病毒疫苗候选株。对该疫苗候选株进行扩大化培养并纯化,获得一定的量以进行后续的免疫学评价。细胞免疫反应是机体针对外来抗原发挥... 

【文章来源】：军事科学院北京市

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略语表
摘要
Abstract
前言
第一章 重组腺病毒载体马尔堡病毒病疫苗候选株的制备
    1.材料和方法
    2.结果
    3.讨论
第二章 马尔堡病毒包膜糖蛋白CTL表位的筛选
    1.材料和方法
    2.结果
    3.讨论
第三章 重组腺病毒载体马尔堡病毒病疫苗候选株的免疫学评价
    1.材料与方法
    2.结果
    3.讨论
第四章 重组腺病毒载体马尔堡病毒病疫苗候选株的保护性评价
    1.材料与方法
    2.结果
    3.讨论
第五章 结论与展望
参考文献
附录1 主要溶液配制
附录2 GP序列
作者在学期间取得的学术成果
主要简历
致谢



本文编号：3197999