植物来源的抗氧化物对CD34 + 细胞体外扩增的影响

发布时间：2021-05-24 13:59

　　体外扩增是解决脐血造血干细胞（hematopoietic stem cells,HSCs）移植过程中数量不足的有效方法。在HSCs的体外扩增过程中添加糖类、细胞因子等外源性物质,导致细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平急剧增加,破坏细胞内的氧化还原动态平衡,造成细胞功能损伤,影响HSCs的体外增殖。因此,有必要对HSCs体外培养过程中细胞内ROS水平进行调控。黄酮类、多酚类和蒽醌类化合物广泛存在于各种植物中,具有抗氧化活性,在一定的浓度范围内能够有效的清除自由基,有利于细胞的体外增殖。为此,本文以新鲜分离的脐血CD34+细胞为起始细胞,在无血清培养体系中考察了黄酮类抗氧化物（葛根素和金丝桃苷）浓度对CD34+细胞体外扩增的影响。结果发现:0.1μM葛根素能够有效地提高总细胞和CD34+细胞的扩增;与对照组相比,1μM金丝桃苷能够促进总细胞、CD34+细胞和CD34+CD38-细胞的扩增,并且两组之间CD34+细胞的再扩增能力无显著性差异。培养体系中添加1μM金丝桃苷培养14d后,总细胞、CD34+细胞和CD34+CD38-细胞的扩增倍数分别为54.... 

【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 前言
    1.1 造血干细胞特性及其临床应用
        1.1.1 造血干细胞的生物学特性
        1.1.2 脐血造血干细胞临床应用的现状
    1.2 造血干细胞体外扩增的影响因素
        1.2.1 培养基
        1.2.2 细胞因子组合
        1.2.3 基质细胞与HSCs共培养体系
        1.2.4 氧分压
    1.3 造血干细胞与骨髓微环境
        1.3.1 骨髓微环境的组成及其作用
        1.3.2 低氧微环境对HSCs的影响
    1.4 活性氧对造血干细胞功能的调控
        1.4.1 活性氧的产生
        1.4.2 细胞内活性氧的清除机制
        1.4.3 活性氧对造血干细胞生理功能的影响
    1.5 抗氧化物对细胞生理功能的影响
        1.5.1 抗氧化物及其作用机制
        1.5.2 黄酮类抗氧化物对细胞功能的影响
        1.5.3 多酚类抗氧化物对细胞功能的影响
        1.5.4 蔥醌类抗氧化物对细胞生理状态的影响
    1.6 课题研究内容及意义
第2章 材料与方法
    2.1 实验仪器与设备
    2.2 实验试剂
        2.2.1 细胞分离试剂
        2.2.2 培养基
        2.2.3 细胞因子
        2.2.4 抗氧化剂
        2.2.5 免疫荧光抗体
        2.2.6 其他试剂
    2.3 实验方法
        2.3.1 CD34~+细胞的分离
        2.3.2 CD34~+细胞的培养
        2.3.3 CD34~+细胞的再扩增培养
        2.3.4 细胞计数
        2.3.5 细胞表型分析
        2.3.6 细胞中活性氧(ROS)水平的检测
        2.3.7 细胞凋亡测定
        2.3.8 统计学分析
第3章 黄酮类抗氧化物对CD34~+细胞体外扩增的影响
    3.1 葛根素的浓度对CD34~+细胞体外扩增特性的影响
    3.2 金丝桃苷浓度对CD34~+细胞体外扩增特性的影响
    3.3 金丝桃苷对CD34~+细胞再扩增的影响
    3.4 金丝桃苷对CD34~+细胞体外培养过程中细胞内ROS水平的影响
    3.5 金丝桃苷对细胞凋亡的影响
    3.6 讨论
    3.7 本章小结
第4章 多酚类、蔥醌类抗氧化物对CD34~+细胞体外扩增的影响
    4.1 儿茶素对CD34~+细胞体外扩增特性的影响
        4.1.1 儿茶素浓度对CD34~+细胞体外扩增的影响
        4.1.2 儿茶素对CD34~+细胞再扩增的影响
        4.1.3 儿茶素对CD34~+细胞体外培养过程中细胞内ROS水平的影响
        4.1.4 儿茶素对细胞凋亡的影响
    4.2 芦荟大黄素对CD34~+细胞体外扩增特性的影响
        4.2.1 芦荟大黄素浓度对CD34~+细胞体外扩增的影响
        4.2.2 芦荟大黄素对CD34~+细胞再扩增的影响
        4.2.3 芦荟大黄素对CD34~+细胞体外培养过程中细胞内ROS水平的影响
        4.2.4 芦荟大黄素对细胞凋亡的影响
    4.3 讨论
    4.4 本章小结
第5章 全文总结与展望
    5.1 全文总结
    5.2 展望
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]活性氧·抗氧化酶及抗氧化剂之间关系的探讨[J]. 唐功.  安徽农业科学. 2010(33)
[2]植物提取物抗氧化成分及机理研究进展[J]. 谭榀新,叶涛,刘湘新,贺建华.  食品科学. 2010(15)
[3]黄酮类化合物抗氧化及其作用机制的研究进展[J]. 曹志超,顾翔,苏佩清.  实用临床医药杂志. 2009(13)
[4]儿茶素对小鼠造血祖细胞的刺激增殖作用[J]. 闫丽莎,刘屏,王东晓,陈孟莉,陈桂芸.  中国药师. 2008(05)
[5]Hematopoietic-supportive effect of （2S, 3R）-ent-catechin on marrow-depressed mice[J]. CHEN Yi-hong, WANG Dong-xiao, LIU Ping, CHEN Ruo-yun, CHEN Meng-li, CHENG Liu-fang, YIN Jian-fen and CHEN Gui-yun Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100050, China Research Institute for Clinical Pharmacology, General Hospital of PLA, Beijing 100853, China.  Chinese Medical Journal. 2005(13)
[6]蒽醌衍生物与β-胡萝卜素自由基抗氧化协同作用的研究[J]. 崔剑,李兆陇,洪啸吟.  化学学报. 2004(12)
[7]芦荟抗氧化物质活性及对红细胞的保护作用[J]. 王关林,田兵,方宏筠,马小琼.  营养学报. 2002(04)
[8]细胞凋亡的分子机制[J]. 赵宇彤,赵晶,崔秀云,田余祥,赵宝昌.  生物工程进展. 1999(03)



本文编号：3204307