弓形虫GRA1/MIC6双价核酸疫苗及亚单位疫苗的研究

发布时间：2021-06-05 08:29

　　刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）简称弓形虫，是一种细胞内寄生原虫，具有人兽共患、机会性致病特点。弓形虫寄生于人体及动物有核细胞，造成多组织器官的损害，引起弓形虫病。孕妇感染后，还可出现流产、早产、畸形等不良妊娠结局和不孕[1]，在免疫功能低下者如艾滋病患者，是其致死的主要原因。弓形虫呈世界性分布，人、兽感染率均极高，给人类健康和经济社会发展带来了较大的影响。因此弓形虫病是医学领域重点防治的一种寄生虫病。为探索GRA1/MIC6基因对弓形虫感染的免疫保护性，本试验对基因GRA1、MIC6进行引物设计，将GRA1、MIC6基因及其串联基因与真核表达载体pVAX1及原核表达载体pET28-a相连，构建真核及原核表达载体。另外在两基因串联的基础上插入了CpG-ODN加强序列，分别与真核表达载体pVAX1及原核表达载体pET28-a相连。将质粒转染到Hela细胞中，用间接免疫荧光及Western blot方法验证在Hela内表达。将原核表达质粒导入大肠杆菌，表达出重组的蛋白。将核酸疫苗、亚单位疫苗分别对小鼠接种，进行免疫保护分析。结果：GRA1，MIC6基因得到有效扩增，经比对，... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

GRA1及L-GRA1基因PCR扩增凝胶电泳分析

6 基因的 PCR 扩 基因扩增结果为6 基因 PCR 扩增凝胶tic analysis result of Mer（DL2000）；1：M1 M 2bp1

IC6 基因的 PCR 扩增6 基因扩增结果为 10IC6 基因 PCR 扩增凝胶电retic analysis result of MICrker（DL2000）；1：MI1050b1 M 2

【参考文献】：
期刊论文
[1]刚地弓形虫基因工程疫苗[J]. 徐安健,谷俊朝.  中国生物工程杂志. 2009(11)
[2]重组人IL-2及IFN-γ对感染弓形虫妊娠鼠T细胞亚群的影响[J]. 杨顺,钱建新,褚静英,冯萍,朱雪明.  中国血吸虫病防治杂志. 2008(05)
[3]弓形虫SAG1-MIC3融合基因真核表达载体的构建与鉴定[J]. 田小东,古钦民,周怀瑜,张加勤,丛华,赵群力,李瑛.  中国病原生物学杂志. 2008(03)
[4]弓形虫代谢分泌抗原在免疫中研究进展[J]. 张德林,李学瑞,王艳华,李惠萍,刘伯林.  中国人兽共患病学报. 2007(12)
[5]弓形虫微线体蛋白研究进展[J]. 李学瑞,赵象忠,王艳华,张德林.  中国人兽共患病学报. 2006(04)
[6]弓形虫SAG1单基因疫苗与SAG1-ROP2复合基因疫苗的免疫效果观察[J]. 杨婷婷,何深一,张加勤,周怀瑜,丛华,古钦民,李瑛,赵群力.  中国人兽共患病杂志. 2005(05)
[7]弓形虫P30-P22复合DNA疫苗免疫小鼠诱导的体液免疫应答[J]. 孙怡,何深一,古钦民,李瑛,丛华,周怀愉,赵群力.  临沂医学专科学校学报. 2004(06)
[8]弓形虫疫苗研究新进展[J]. 蒋华,何深一.  国外医学(寄生虫病分册). 2004(06)
[9]CpG-DNA免疫刺激活性研究进展[J]. 景志忠,才学鹏.  中国兽医杂志. 2004(09)
[10]弓形虫P24基因编码蛋白的分子生物学研究进展[J]. 彭碧文,林建银.  国外医学(寄生虫病分册). 2004(03)



本文编号：3211813