脂质体方法用于modRNA转染各种类型细胞的初步研究

发布时间：2021-06-06 00:35

　　目的筛选更优的脂质体转染试剂,探讨其用于modRNA转染各种类型细胞并表达所需目的蛋白的可行性。方法分别用RNAiMax及MessageMax将modGFP转染入MEF细胞,应用荧光显微镜、流式细胞分析仪检测并比较两种转染试剂的转染效率和蛋白表达效果。将更优的转染试剂用于modGFP转染其他各种类型细胞的实验中,采用同样的方法分析modGFP的转染效率及蛋白表达情况。将modGFP与modmCherry共转MEF细胞,荧光显微镜观察共转的情况。将modnGFP及modmTBX5转染MEF细胞,荧光显微镜观察核内蛋白的表达情况。结果 MEF细胞转染modGFP 24 h后,流式分析发现MessageMax的转染效率为（83.33%±3.23%）,略高于RNAiMax的（78.77%±6.12%）,两者没有统计学差异,但是流式分析和荧光显微镜观察均表明MessageMax转染后1周内的蛋白翻译表达效率更高,是更高效的modRNA转染试剂。MessageMax能将modC;FP高效转染人3T3细胞、Hela细胞及MCF-7细胞中,并实现modGFP和modmCherry在MEF细胞中的共转及... 

【文章来源】：组织工程与重建外科杂志. 2019,15(06)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

modRNA制备过程中质粒、酶切、PCR、体外转录的鉴定结果

图2 两种modRNA转染试剂的转染效率及蛋白表达强度

modGFP转染3T3细胞、Hela细胞及MCF-7细胞的荧光图及流式分析


本文编号：3213224