人羊膜间充质干细胞来源外泌体的提取与鉴定

发布时间：2021-06-21 23:22

　　目的探索人羊膜间充质干细胞来源外泌体（hAMSC-Exos）的分离、纯化与鉴定方法,为外泌体的生物学功能研究奠定基础。方法由废弃的羊膜提取间充质干细胞;采取改良超速离心法分离、纯化培养液上清中的hAMSC-Exos;透射电镜观察、纳米粒子跟踪分析技术（NTA）、Western blot和流式细胞术用于hAMSC-Exos的鉴定外泌体。结果成功用改良超速离心法分离出hAMSC-Exos,透射电镜（TEM）下观察呈中间凹陷的茶杯样结构;NTA结果显示样品直径符合外泌体直径大小;Western blot和流式细胞术证实外泌体表面特异性蛋白CD9、CD63、CD81表达阳性。结论建立了hAMSC-Exos的提取纯化及鉴定方法,为它后续的研究提供依据。 

【文章来源】：解剖科学进展. 2020,26(02)

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 标本与细胞
    1.2 hAMSCs的分离、培养
    1.3 hAMSCs流式细胞鉴定
    1.4 hAMSC-Exos的分离与纯化
    1.5 透射电子显微镜鉴定hAMSCs-Ex
    1.6 NTA鉴定hAMSCs-Ex
    1.7 Western Blot检测h AMSCs-Ex表面标记CD9、CD63、CD81
    1.8 流式细胞仪鉴定hAMSCs-Ex表面标记
2 结果
    2.1 hAMSCs细胞的分离和培养
    2.2 流式细胞术鉴定hAMSCs
    2.3 透射电子显微镜鉴定hAMSC-Exos
    2.4 NTA鉴定hAMSC-Exos
    2.5 Western Blot检测hAMSCs-Ex表面标记蛋白
    2.6 流式细胞术鉴定hAMSCs-Ex表面标记蛋白
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]BMSCs-exo对紫外线诱导成纤维细胞光老化的保护作用[J]. 赵翡,朱华,马海英,卢晓梅,马玲,于艳秋.  解剖科学进展. 2019(05)
[2]间充质干细胞对慢性间质性肾炎大鼠转分化相关细胞因子表达的影响[J]. 李维,李优,姜红.  解剖科学进展. 2018(06)
[3]Exosome and Exosomal MicroRNA: Trafficking, Sorting, and Function[J]. Jian Zhang,Sha Li,Lu Li,Meng Li,Chongye Guo,Jun Yao,Shuangli Mi.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2015(01)



本文编号：3241627