金黄色葡萄球菌肠毒素B精制免疫球蛋白对小鼠中毒模型的免疫救治效果研究

发布时间：2021-06-22 18:53

　　目的:研制金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）精制免疫球蛋白,即马抗SEB免疫球蛋白F（ab′）2制品,为SEB中毒的救治提供候选药。方法:利用传统的发酵和纯化工艺制备天然SEB纯品,并建立小鼠实验动物模型;利用分子克隆和蛋白质纯化技术,克隆、表达、纯化重组SEB,加入适量弗氏佐剂充分乳化,免疫马匹,测定免疫马匹血清中和抗体效价后采血,分离血清,按照成熟的生产工艺制备治疗性抗体成品;对成品进行安全性检测及免疫救治效果评价。结果:纯化的天然SEB经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为0.5μg/kg;纯化的重组SEB表达量超过2 mg/mL,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为50μg/kg;免疫马匹血清中和抗体效价达2000 U/mL以上时,采血并制备F（ab′）2成品,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度在80%以上,中和抗体效价超过2500 U/mL;安全性符合现行《中国药典》要求;对SEB中毒动物模型有很好的免疫救治效果。结论:建立了SEB精制免疫球蛋白制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求... 

【文章来源】：生物技术通讯. 2019,30(06)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

重组SEB检测结果

天然SEB检测结果

SEB精制免疫球蛋白成品检定结果

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3243363