铜绿假单胞菌外膜囊泡对肺上皮细胞分泌细胞因子的影响

发布时间：2021-07-01 21:46

　　目的:观察铜绿假单胞菌外膜囊泡（OMVs）对肺上皮细胞分泌细胞因子的影响。方法:培养肺上皮细胞BEAS–2B,采用1、10和30μg·mL-1浓度OMVs刺激12、16或24 h,实时定量聚合酶链式反应（PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肿瘤坏死因子（TNF–α）和白细胞介素8（IL–8）和mRNA表达。ELISA检测培养上清TNF–α和IL–8分泌的变化;提取核蛋白,采用ELISA测定OMVs处理前后核因子κB（NF–κB）活性,并采用NF–κB抑制剂处理细胞,观察对OMVs诱导TNF–α和IL–8分泌的影响。结果:采用1μg·mL^-1、10μg·mL^-1和30μg·mL^-1 OMVs处理BEAS–2B细胞12 h后,TNF–α和IL–8的mRNA水平均高于阴性对照组,呈一定的剂量依赖性。30μg·mL^-1 OMVs作用细胞4 h后即可上调TNF–α和IL–8 mRNA表达,并持续至16 h。30μg·mL^-1 OMVs处理细胞后,NF–κB的活性明显增强,NF–κ... 

【文章来源】：深圳中西医结合杂志. 2019,29(22)

【文章页数】：2 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要实验试剂
    1.2 铜绿假单胞菌培养与OMVs提取
    1.3 细胞培养与处理
    1.4 ELISA检测TNF–α和IL–8分泌
    1.5 实时定量PCR检测mRNA表达
    1.6 NF–κB活性测定
    1.7 统计学方法
2 结果
    2.1 OMVs以剂量依赖性方式诱导BEAS–2B细胞表达TNF–α和IL–8 mRNA
    2.2 OMVs诱导BEAS–2B细胞分泌TNF–α和IL–8
    2.3 OMVs经NF–κB诱导BEAS–2B细胞分泌TNF–α和IL–8
3 讨论



本文编号：3259924