全反式维甲酸通过ERK1/2信号通路抑制结肠癌细胞增殖

发布时间：2021-07-13 00:49

　　研究背景和目的:结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,大约50%结肠癌发生与Ras基因突变有关。大量研究表明Ras-MEK1/2-ERK1/2信号途径在多种肿瘤（包括结肠癌）的发生、发展及转移过程中处于异常活化状态。维甲酸（retinoi acid）属于维生素A类化合物家族,因为羧基方向不同而分为两种异构体,即全反式维甲酸（ATRA）和顺式维甲酸。ATRA能够诱导多种肿瘤细胞分化或抑制肿瘤细胞的增殖。故而本次实验旨在探讨全反式维甲酸（ATRA）是否通过作用ERK1/2信号通路抑制结肠癌细胞增殖及可能的分子机制。方法:MTT法检测示ATRA能够抑制结肠癌细胞增殖,RT-PCR及Western Blot法检测经ATRA处理的结肠癌LS174T细胞中MEK1/2-ERK1/2的表达水平。流式细胞仪测定LS174T细胞经ATRA与PD98059（MEK1/2的特异性抑制剂）联合处理后的凋亡水平。结果:MTT法检测示ATRA抑制结肠癌细胞增殖;RT-PCR及Western Blot法示ATRA能提高LS174T细胞中ERK2 mRNA水平,增强MEK/ERK蛋白表达,促进ERK磷酸化。PD98059与A... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：37 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

结肠癌LS174T细胞的生长曲线

图2 A)LS174T细胞的ERK2的RT-PCR结果。B)根据Volume ERK2/Vβ-actin 的比值制作出的柱形图。1组：无血清培养基对照组；2组：10-5mol/LATRA+无血清培养基3组：含10 %胎牛血清（FBS）培养液对照组；4组：10-5mol/LAT含10 %FBS培养液刺激组。表 3 RT-PCR 结果 ERK2/ACTIN 比值（ ）Group 2天 4天 1组 0.716±0.0315 0.8136±0.0236 02组 0.8386±0.0373 0.9448±0.0294 03组 0.9006±0.0448 1.8358±0.0322 14组 0.9264±0.0159 1.9434±0.0163 1

mol/LATRA后，加药组与相应对照组相比，MEK 1/2、p-MEK1/2、ERK1、ERK2、p-ERK蛋白活化趋势一致，且略有升高（图3A）。为排除胎牛血清对细胞p-ERK表达的影响，我们在缺乏血清的RPIM1640培养基中培养结肠癌细胞，并同时加入药物ATRA。MEK 1/2、p-MEK1/2、ERK1、ERK2、p-ERK蛋白在表达量上，ATRA处理组明显高于相应不加药处理组（图3B）。图3 ATRA提高结肠癌LS174T细胞MEK/ERK蛋白表达，促进ERK磷酸化。A) 在含10%胎牛血清的RPMI培养基中，LS174T细胞在ATRA刺激下，MEK/ERK、P-ERK1/2蛋白表达均略比正常对照组高。B）在无血清的RPMI培养基中，ATRA刺激结肠癌细胞MEK/ERK 蛋白表达


本文编号：3280997