内脂素对急性肺损伤肺内细胞凋亡和自噬以及PI3K/AKT信号通路的影响

发布时间：2023-09-16 09:52

　　内脏脂肪素,简称内脂素(Visfatin),是近年来新发现的一种参与机体炎症和免疫应答反应的脂肪细胞因子,它的发现推动了脂肪组织和炎症之间关系的研究,而炎症又可以引起细胞凋亡和自噬,所以内脂素可能直接或间接影响细胞凋亡和自噬反应。急性肺损伤(ALI)是全身炎症反应综合征表现在肺部的呼吸系统性疾病,经常被用作一种炎症模型。研究发现,在急性肺损伤动物模型中,肺泡灌洗液的内脂素水平升高,推测内脂素作为炎性介质可能参与肺部炎症的发生和发展,从而影响细胞凋亡和自噬。因此,本试验以昆明小鼠为研究对象,利用LPS构建的急性肺损伤模型,通过HE染色、TUNEL、透射电镜、免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR和Western blot等技术方法研究内脂素对急性肺损伤肺部细胞凋亡、自噬及PI3K/AKT信号通路的作用,以探讨内脂素是否通过PI3K/AKT信号通路调节凋亡和自噬参与炎症反应,阐明内脂素在LPS介导的炎症反应中与肺内细胞凋亡和自噬之间的关系及作用机制。研究结果如下:1.内脂素对急性肺损伤肺组织结构的影响利用LPS诱导构建的急性肺损伤模型,取肺组织制作石蜡切片并进行HE染色。显微镜下观察:生理盐...

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语表
1 前言
    1.1 立题背景
    1.2 文献综述
        1.2.1 内脂素的研究进展
        1.2.2 急性肺损伤的研究进展
        1.2.3 内脂素与急性肺损伤的关系
        1.2.4 细胞凋亡与自噬之间的关系
        1.2.5 PI3K/AKT信号通路的研究进展
    1.3 研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验动物及处理
        2.1.2 主要仪器与试剂
        2.1.3 主要溶液和试剂的配制
    2.2 试验方法
        2.2.1 样品采集和处理
        2.2.2 石蜡切片的制作
        2.2.3 HE染色
        2.2.4 透射电镜
        2.2.5 细胞凋亡检测技术(TUNEL法)
        2.2.6 免疫组化
        2.2.7 荧光定量q-PCR
        2.2.8 Western Blot
3 结果
    3.1 不同试验组肺组织结构的变化
        3.1.1 肺组织病理学变化
        3.1.2 小鼠肺组织内血管内皮生长因子的表达
    3.2 内脂素对急性肺损伤肺组织细胞凋亡的影响
        3.2.1 凋亡细胞的检测
        3.2.2 不同试验组凋亡因子的mRNA表达
        3.2.3 不同试验组凋亡相关因子的蛋白表达
    3.3 内脂素对急性肺损伤肺组织细胞自噬的影响
        3.3.1 透射电镜检测自噬小体
        3.3.2 不同试验组自噬因子的定位表达
        3.3.3 不同试验组自噬因子的mRNA表达
        3.3.4 不同试验组自噬因子蛋白的表达
    3.4 内脂素对急性肺损伤PI3K/AKT信号通路相关基因的影响
4 讨论
    4.1 内脂素对急性肺损伤肺组织结构的影响
    4.2 内脂素对急性肺损伤肺组织细胞凋亡的影响
    4.3 内脂素对急性肺损伤肺组织细胞自噬的影响
    4.4 急性肺损伤肺中内脂素、细胞自噬和凋亡之间的关系
    4.5 内脂素对PI3K/AKT信号通路的影响
5 结论
参考文献
致谢
附录1 个人简介
附录2 论文发表情况



本文编号：3846796