miR1-2诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化过程中的Wnt/β-catenin信号通路

发布时间：2022-12-24 12:37

　　背景:骨髓间充质干细胞具有向心肌细胞分化的潜能,但其分化率较低,且其分化机制尚不完全明确。目的:探讨miR1-2在小鼠骨髓间充质干细胞分化成心肌样细胞中的作用,揭示此过程中涉及的信号通路。方法:用miR1-2和5-氮杂胞嘧啶处理小鼠骨髓间充质干细胞。通过q PCR检测心肌细胞标志物GATA4在骨髓间充质干细胞中的表达。流式细胞术检测细胞凋亡率,并通过测定该信号通路的上游蛋白评价Wnt/β-catenin信号通路的活性。结果与结论:（1）miR1-2模拟物转染骨髓间充质干细胞24 h后,miR1-2在骨髓间充质干细胞中的表达显著增加。miR-2模拟物处理48 h后,骨髓间充质干细胞的凋亡率无显著差异;（2）转染miR1-2模拟物48 h后,与对照组相比,GATA4的表达随着时间的延长显著增加,处理72 h后,这些基因在miR1-2组中的表达显著高于5-氮杂胞嘧啶组和对照组;（3）与miR1-2-mimics-NC相比,用miR1-2模拟物处理后,β-catenin和Wnt11的m RNA和蛋白相对表达均显著增加,而添加Wnt/β-catenin信号通路抑制剂LGK-974后,β-cate... 

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文题释义:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
        1.3.1 实验动物
        1.3.2 实验主要仪器与试剂
    1.4 方法
        1.4.1 骨髓间充质干细胞的分离和体外培养[21]
        1.4.2骨髓间充质干细胞转染
        1.4.3 细胞凋亡测定
        1.4.4 Real-time PCR检测GATA4、Wnt11和β-catenin的mRNA表达
        1.4.5 Western blot法检测GATA4蛋白的表达
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果Results
    2.1 5-氮杂胞嘧啶和miR1-2处理的骨髓间充质干细胞中miR1-2的表达水平
    2.2 5-氮杂胞嘧啶和miR-1模拟物对骨髓间充质干细胞凋亡的影响
    2.3 miR1-2的高度表达诱导骨髓间充质干细胞中心脏特异性基因的表达
    2.4 高表达miR1-2激活Wnt/β-catenin信号通路
    2.5 miR1-2通过Wnt/β-catenin信号传导激活诱导心肌细胞分化
3 讨论Discussion


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3726155